吴思敏，王钊哲，许 瑞，林矫矫，洪 炀，陈兆国，陆 珂，李 浩，石耀军，江嘉欣，李嘉静，朱传刚，唐亚兰

（1.中国农业科学院上海兽医研究所 农业部寄生虫学重点开放实验室 国家防治动物血吸虫病专业实验室，上海200241；2. 韶关学院英东生命科学学院，韶关512000）

猪瘟病毒表面抗原E2基因的克隆与原核表达

吴思敏1,2，王钊哲1，许 瑞1，林矫矫1，洪 炀1，陈兆国1，陆 珂1，李 浩1，石耀军1，江嘉欣1,2，李嘉静1,2，朱传刚1，唐亚兰1

（1.中国农业科学院上海兽医研究所 农业部寄生虫学重点开放实验室 国家防治动物血吸虫病专业实验室，上海200241；2. 韶关学院英东生命科学学院，韶关512000）

为获得可用于诊断的猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）E2蛋白重组抗原，对CSFV-E2的多个B细胞抗原表位进行重构和表达。将人工合成的E2蛋白多抗原表位基因与pET-28a(+)载体连接后，转化至宿主菌BL21（DE3），IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳分析蛋白可溶性，His亲和层析柱纯化蛋白并进行抗原性检测。重构后的猪瘟病毒E2基因多抗原表位基因大小约500 bp，PCR、双酶切鉴定结果显示与预期相符；重组蛋白为可溶性表达，大小约23 kDa； Western blot结果显示，重组蛋白可与猪瘟阳性血清发生特异性结合，具有良好的免疫反应性，可作为诊断抗原用于猪瘟病毒感染动物的血清抗体检测。

猪瘟病毒；E2基因；原核表达；蛋白纯化

猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）是一类具有包膜的小型RNA病毒，属于黄病毒科，瘟病毒属[1]。猪瘟是一种高度传染性疾病，后期常伴有伤寒及巴氏杆菌病继发，一年四季都有发生，以春夏多雨季为多。因其高传染性给养猪业造成了巨大的经济损失，长久以来一直是养猪业的重要威胁[2]。……