弓形虫胶体金免疫层析试纸条的研制
2017-11-13王钊哲林矫矫陈兆国唐亚兰吴思敏江嘉欣李嘉静朱传刚
中国动物传染病学报 2017年5期
王钊哲,许 瑞,洪 炀,林矫矫,2,陆 珂,李 浩,陈兆国,唐亚兰,吴思敏,江嘉欣,李嘉静,朱传刚
(1.中国农业科学院上海兽医研究所 农业部寄生虫学重点开放实验室 国家防治动物血吸虫病专业实验室,上海200241;2.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009)
弓形虫胶体金免疫层析试纸条的研制
王钊哲1,许 瑞1,洪 炀1,林矫矫1,2,陆 珂1,李 浩1,陈兆国1,唐亚兰1,吴思敏1,江嘉欣1,李嘉静1,朱传刚1
(1.中国农业科学院上海兽医研究所 农业部寄生虫学重点开放实验室 国家防治动物血吸虫病专业实验室,上海200241;2.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009)
为了研制一种可用于检测弓形虫的快速诊断胶体金免疫层析试纸条,本研究对弓形虫表面抗原(surface antigen,SAG)SAG1和SAG2的基因片段进行重构合成,与PET-28a(+)载体连接后,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中表达,利用His亲和层析柱对融合蛋白进行纯化,获得SAG重组表位抗原,Western blot对重组蛋白免疫原性进行分析。用rSAG重组蛋白及rSPG分别划线,作为检测线和质控线,制作胶体金免疫层析试纸条,利用小鼠弓形虫阳性血清及小鼠阴性血清检验胶体金免疫层析试纸条检查效果。本研究成功表达纯化了SAG抗原表位的重组蛋白,且该重组蛋白具有较好的免疫原性。以此多抗原表位的重组蛋白作为检查抗原研制了胶体金免疫层析试纸条,能够快速检测弓形虫的阳性血清,为基层弓形虫病的快速诊断奠定了基础。
胶体金免疫层析试纸条;重组蛋白;……
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