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日本血吸虫高迁移率族蛋白B1诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞M1型极化

2017-11-13史晓娜苑纯秀赵小超李玉梅侯旖旎冯新港

中国动物传染病学报 2017年5期
关键词:小鼠检测

艾 敏,史晓娜,2,苑纯秀,3,赵小超,李玉梅,2,侯旖旎,2,冯新港

(1.中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200241;2.上海师范大学生命与环境科学学院,上海 200234;3.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009)

日本血吸虫高迁移率族蛋白B1诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞M1型极化

艾 敏1,史晓娜1,2,苑纯秀1,3,赵小超1,李玉梅1,2,侯旖旎1,2,冯新港1

(1.中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200241;2.上海师范大学生命与环境科学学院,上海 200234;3.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009)

通过分析日本血吸虫高迁移率族蛋白B1(Schistosoma japonicum high mobility group protein B1,SjHMGB1)刺激的巨噬细胞的表型相关分子的表达情况,研究SjHMGB1诱导巨噬细胞向M1型极化的功能。分别用LPS及IFN-γ和IL-4诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞成M1型和M2型作为阳性对照组,以SjHMGB1诱导的巨噬细胞为实验组。分别利用Griess法、FCM、RTPCR和酶活性检测巨噬细胞中iNOS、CD16/32、ArginaseⅠ、CD206等主要标志分子。结果与空白对照组相比,SjHMGB1刺激组和M1型阳性对照组巨噬细胞NO分泌显著增加,精氨酸酶活性变化不显著,M2型巨噬细胞呈现相反的表型。流式结果显示SjHMGB1刺激组和M1型阳性对照组的巨噬细胞诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和CD16/32表达上调,而CD206变化不明显。RT-PCR结果显示SjHMGB1蛋白刺激组和M1型阳性对照组的巨噬细胞iNOS表达上调,而arginaseⅠ和CD206变化不明显;M2型巨噬细胞arginaseⅠ表达水平明显升高,CD206表达上调。结果表明SjHMGB1能够诱导巨噬细胞往M1型巨噬细胞分化。

SjHMGB1蛋白;M1型巨噬细胞;精氨酸酶;诱导型一氧化氮合成酶

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