猪圆环病毒2型一步间接免疫荧光试验的建立及初步应用
2017-11-13扈荣良
宫 婷,扈荣良
(1.辽宁省本溪市桓仁满族自治县畜产品安全监察所,桓仁满族自治区 117200;2.军事医学科学院军事兽医研究所 吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室,长春 130122)
猪圆环病毒2型一步间接免疫荧光试验的建立及初步应用
宫 婷1,扈荣良2
(1.辽宁省本溪市桓仁满族自治县畜产品安全监察所,桓仁满族自治区 117200;2.军事医学科学院军事兽医研究所 吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室,长春 130122)
本研究利用大肠杆菌表达的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)Cap蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,然后将其与FITC标记羊抗兔二抗预混相互作用,制成预混液后与预固定样品(病料或组织细胞)相互作用,通过荧光观察检测PCV2,建立了一步间接免疫荧光试验(one-step indirect immuno fl uorescence assay,OS-IIFA)。应用OS-IIFA和PCR对广东省各地猪场采集的79份病料样品进行检测,阳性率分别为58.23%和69.62%,二者的阳性符合率为80%,阴性符合率为91.66%,总符合率为83.54 %,因此,该方法可作为PCV2流行病学调查及临床监测的有效手段。
猪圆环病毒2型;OS-IIFA;PCR;检测
猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)属于圆环病毒科、圆环病毒属,该病毒粒子无囊膜,呈二十面体对称,直径为14~25 nm,基因组为1.7 kb大小的单股负链环状DNA,是迄今发现的最小的动物病毒之一[1,2]。根据PCV的致病性、抗原性及核苷酸序列,将其分为PCV1和PCV2两型[1,2]。1974年德国科学家首次发现并证实PCV1为猪肾细胞系的一种污染物。虽然猪群中普遍存在PCV-1感染,但它无致病性,不能引起明显的临床症状[3]。而PCV2具有致病性,主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(post weaning multisystemic wasting syndrome,PMWS),还是猪皮炎肾病……
