高 琪，张国超，何 琦，董信芳，雒艳萍，车团结，马兴铭

（1兰州大学基础医学院，2甘肃省功能基因组与分子诊断重点实验室，甘肃兰州730000）

hMASP2 DNA纳米脂质体对BCG感染小鼠肺组织T细胞亚群和AKT/pAKT蛋白表达的影响

高 琪1，张国超1，何 琦1，董信芳1，雒艳萍1，车团结2，马兴铭1

（1兰州大学基础医学院，2甘肃省功能基因组与分子诊断重点实验室，甘肃兰州730000）

目的：构建hMASP2 DNA纳米脂质体复合物，探讨hMASP2 DNA纳米脂质体对BCG感染小鼠肺组织T细胞亚群和AKT/pAKT蛋白表达的影响.方法：构建pcDNA3.1⁃hMASP2重组表达质粒，以脂质体作为载体，制备质粒DNA纳米脂质体复合物并检测Zeta电位和粒径；经鼻滴入1×109CFU BCG 100 μL，建立结核分枝杆菌感染小鼠模型，实验分DNA纳米脂质体组（pcDNA3.1⁃hMASP2组）和对照组，在感染当天小鼠尾静脉分别注射pcDNA3.1⁃hMASP2 200 μL（25 μg DNA）和PBS 200 μL，每3天注射一次，连续治疗三周后处死小鼠；分离肺组织淋巴细胞，流式细胞仪检测T细胞亚群；肺组织免疫组化分析AKT、pAKT蛋白表达.结果：pcDNA3.1⁃hMASP2 DNA纳米脂质体复合物Zeta电位52.6 mV、平均粒径279.9 nm；与对照组相比，pcDNA3.1⁃hMASP2组小鼠肺组织CD4＋T细胞亚群百分比明显升高（P＜0.05）、CD4＋PD⁃1＋T细胞亚群百分比降低（P＜0.05）；pcDNA3.1⁃hMASP2组小鼠肺组织AKT和pAKT的阳性细胞百分比明显增高（P＜0.05）.结论：构建稳定的pcDNA3.1⁃hMASP2 DNA纳米脂质体复合物，pcDNA3.1⁃hMASP2纳米脂质体增加BCG感染小鼠的肺组织的CD4＋T细胞、促进肺组织pAKT蛋白的表达，降低肺组织的PD⁃1＋T细胞亚群，从而上调小鼠T细胞功能.

纳米脂质体；MASP2；结核病；PD⁃1；AKT

0 引言

结核病（tuberculosis，TB）现已成为备受大家关注的全球性健康问题.2015年，世界各地估计有1040万例新发活动性结核病，同年全球造成约140万人死亡［1］.结核病是严重危害人类健康的经呼吸道传播的慢性传染病，近年来，我国每年报告肺结核发病人数约100万，始终位居全国甲乙类传染病的前列；……