许军，杜晓婷，张扬，袁正宏，易志刚

复旦大学基础医学院病原生物学系，医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室，上海 200032

·论著·

丙型肝炎病毒感染过程中其NS3/4A蛋白酶切割线粒体抗病毒信号蛋白的动态过程

许军，杜晓婷，张扬，袁正宏，易志刚

复旦大学基础医学院病原生物学系，医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室，上海 200032

已知丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)可通过其蛋白酶NS3/4A切割线粒体抗病毒信号蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein，MAVS)来逃逸天然免疫识别，但尚不清楚其切割动力学及切割在抑制干扰素中的作用。本研究旨在细胞模型中探讨HCV感染过程中病毒复制建立及病毒NS3/4A切割MAVS的动态过程，探究NS3/4A切割MAVS对病毒逃逸宿主天然免疫建立感染的贡献。首先构建基于绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)的MAVS切割报告系统(GFP-NLS-MAVS-TM462)，用 HCV Jc1-Gluc 感染Huh7.5/GFP-NLS-MAVS-TM462细胞。结果显示，病毒复制早期MAVS切割效率较低；NS3/4A高效切割MAVS发生于HCV复制晚期，且其切割效率与NS3蛋白水平相关。利用带有GFP ypet的HCV报告病毒Jc1-378-1感染Huh7.5/RFP-NLS-MAVS-TM462细胞，在单细胞水平观察HCV感染阳性细胞中MAVS被切割情况，发现HCV复制细胞中仅部分细胞MAVS被切割。进一步研究发现，不同基因型NS3/4A切割MAVS的效率仅与NS3表达水平相关。以上结果提示，HCV蛋白酶NS3/4A切割MAVS依赖NS3/4A蛋白在病毒复制过程中的累积，对在病毒复制早期逃逸宿主天然免疫建立感染可能无显著贡献。

丙型肝炎病毒；非结构蛋白3/4A；线粒体抗病毒信号蛋白；干扰素

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)是单股正链RNA病毒，隶属于黄病毒科丙型肝炎病毒属[1]。HCV感染人体后导致70%～80%感染者慢性化，其中部分慢性化患者发展为肝硬化、肝细胞肝癌[2-4]。……