任丽莉　刘超　王一曌

[摘要] 目的 研究活化的蛋白激酶C受体（Receptor for activated protein kinase C，RACK1）与蛋白激酶WEE1互作调控胃癌细胞株HGC27生长增殖及其作用机制。 方法 采用LipofectAMINE 2000在HGC27细胞中过表达RACK1，Western blotting检测HGC27细胞中WEE1蛋白表达；免疫共沉淀验证RACK1和WEE1在HGC27细胞内存在相互作用；细胞内免疫荧光观测RACK1与WEE1在HGC27细胞中的表达定位情况。 结果 过表达RACK1后WEE1在胃癌细胞HGC27中的表达降低，RACK1与WEE1在HGC27细胞内存在相互作用且共定位在细胞质内。结论 RACK1与WEE1共同作用调控胃癌的发生发展过程，为RACK1成为临床上胃癌治疗的潜在靶点提供理论基础和实验依据。

[关键词] 活化的蛋白激酶C受体；WEE1；胃癌；HGC27细胞

[中图分类号] R735.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2017）23-0029-04

[Abstract] Objective To study the regulatory role of the interaction of scaffolding protein RACK1 with protein kinase WEE1 in the proliferation of gastric cancer cell line HGC27 and the mechanism. Methods RACK1 was overexpressed in HGC27 cells by LipofectAMINE 2000. Western blotting was used to detect the expression of WEE1 protein in HGC27 cells. Immunoprecipitation showed that RACK1 interacted with WEE1 in HGC27 cells. Immunofluorescence was used to observe the expression and positioning of RACK1 and WEE1 in HGC27 cells. Results After expression of RACK1， the expression of WEE1 in gastric cancer cells HGC27 was decreased， and RACK1 interacted with WEE1 in HGC27 cells， and they co-localized in cytoplasm. Conclusion The interaction of RACK1 with WEE1 regulates the development and progression of gastric cancer， and it provides the theoretical basis and experimental basis for RACK1 to be a potential target for clinical treatment of gastric cancer.

[Key words] Activated protein kinase C receptor； WEE1； Gastric cancer； HGC27 cells

胃癌是最常见的恶性消化道肿瘤之一，在中国胃癌发病率位于恶性肿瘤第二名。尤其在中国的农村地区，更位于各种恶性肿瘤之首[1]。因此，对胃癌进行早期诊断和治疗十分必要。所以，寻找胃癌的分子标记物对研究胃癌发生发展就显得非常有意义。活化的蛋白激酶C受体（Receptor for activated protein kinase C，RACK1）作为支架蛋白，可介导多种蛋白的性质和功能。如和激活的PKC相互作用，调节其在细胞内定位；作为JNK或HIF1α的锚定蛋白，调节其蛋白的稳定性；和核糖体蛋白相互作用，调节细胞内蛋白的翻译；结合并整合多种信号通路的蛋白分子，调节哺乳动物的发育[2]。因而RACK1可调节体内各种生物学过程，包括信号传导、免疫应答、细胞生长、迁移和分化以及MAPK活化、血管生成、肿瘤生长、神经元反应、细胞凋亡、染色质重塑和生物钟的正常功能[3-6]。最近研究表明，RACK1在细胞周期进程中起着重要调节作用，因而备受大家关注。……