APP下载

N-辛基-2-吡咯烷酮甲磺酸盐离子液体动态涂敷毛细管电泳分离碱性蛋白质

2017-10-19郭小峰周晓海

分析科学学报 2017年5期

李 昀, 郭小峰, 周晓海, 王 红

(生物医学分析化学教育部重点实验室,武汉大学化学与分子科学学院,湖北武汉 430072)

蛋白质是氨基酸经脱水缩合形成酰胺键连接而成的生物大分子,是生命体的重要组成部分和生命活动的基础。蛋白质的分离分析在食品安全、临床医学、生物医药、遗传免疫和生物化学等领域有着重要意义。毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,CE)具有高效、快速、样品和溶剂用量少、灵敏度高等特点,是分离分析蛋白质等生物大分子的强有力工具[1 - 4]。然而,石英毛细管内壁存在大量硅羟基。在pH大于3.0的溶液中硅羟基解离,使毛细管内壁带负电,在毛细管内壁形成带负电荷(Si-O)的吸附点。当背景电解质pH小于蛋白质等电点时,这些负电荷会对带正电荷的蛋白质产生静电吸附[5]。此外,毛细管内壁与蛋白质分子中的疏水区域存在疏水作用[5]。这些相互作用将导致CE分离蛋白质时出现峰形展宽乃至拖尾,导致分离效率降低、迁移时间重现性下降等问题,在相当程度上限制了CE在生物医学分析方面的应用。为解决这一问题,对毛细管内壁进行修饰是一个有效途径,可以屏蔽毛细管内壁的硅羟基,并使石英表面的性质发生转化(通常转化为亲水性表面)[1]。目前,通常采用的修饰方法主要有动态涂敷、物理吸附或化学键合[2]。动态涂敷通过在缓冲溶液中加入与毛细管壁具有强烈相互作用的涂层物质,从而形成动态涂层,具有制备简单快速、涂层可再生等优势,是CE分离蛋白质的一个理想方案[2],目前常采用的动态涂敷试剂主要是中性高分子聚合物和阳离子表面活性剂[6]。……

登录APP查看全文