王祎杰, 王晓英

(东南大学公共卫生学院，江苏南京 210009)

1 引言

p16基因又称MTS1(Multiple Tumor Suppressor 1)基因、p16INK4(细胞周期依赖性激酶CDK4抑制剂)，是美国冷泉港实验室Kamb等[1]于1994年发现的新抗癌基因，位于9p21，其全长8.5 kb，由2个内含子和3个外显子(126bp、307bp、11bp)间隔组成[2]。编码蛋白质是分子量约为16 kDa的单链多肽，故称其为p16基因。

p16基因的表达产物(p16蛋白)可抑制CDK4(细胞周期蛋白依赖性激酶)介导的Rb蛋白磷酸化，其与cyclinD1竞争结合CDK4，致使CDK4正向作用和Rb蛋白磷酸化过程受阻，具活性的Rb蛋白可抑制DNA合成所必需的转录因子等酶的表达[3]。当p16基因失活时，cyclinD1过表达结合CDK4，使Rb蛋白磷酸化，导致其与转录因子(E2F)解离[4]，处于游离态的E2F激活一系列可促使细胞进入S期并进行DNA复制的蛋白表达，进而促使细胞增殖[5]。

研究显示，p16基因已在肺癌[6]、乳腺癌[7]、皮肤癌[8]、胃癌[9 - 10]、肾癌[2,11]、卵巢癌[12 - 13]、咽喉癌[14]、淋巴瘤[15]及黑色素瘤[16]等中发现纯合子缺失，无义、错义及移码突变，表明p16基因以缺失、突变的方式广泛参与肿瘤的形成。检测p16基因有无改变，对判断患者肿瘤的易感性及预测肿瘤的预后具有十分重要的临床意义。本文主要对近年来p16基因相关检测技术的原理、方法及进展作一简要综述。

2 传统检测技术的应用

在过去的几十年里，p16基因已逐渐成为遗传学研究的热点。传统的DNA检测方法包括突变检测(直接法和间接法)及甲基化检测。

2.1 基因突变检测

2.1.1直接法直接法即应用分子生物学技术，根据遗传病的致病基因类型直接对其进行突变检测，以确定受诊者是否携带致病基因，进……