张媛媛

（南京医科大学附属淮安第一医院 检验科，江苏 淮安 223300）

淮安市儿童急性呼吸道感染病原学分析

张媛媛

（南京医科大学附属淮安第一医院 检验科，江苏 淮安 223300）

目的 探讨急性呼吸道感染（ARI）患儿呼吸道病原体的感染情况及季节流行特点，为临床实施行之有效地预防和诊治提供依据。方法 应用间接免疫荧光法（IFA）检测该院2015年1月-2015年12月3 461例0～12岁ARI患儿血清中呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、甲型流感病毒（FluA）、乙型流感病毒（FluB）、副流感病毒（PIV）、肺炎支原体（MP）、肺炎衣原体（CP）、嗜肺军团菌（LP）IgM抗体。结果 3 461份血清中呼吸道感染病原体IgM抗体阳性检出率为69.17%，最常检测到的病原体是FluB（51.11%）、FluA（36.38%）、MP（25.14%）和RSV（9.04%）。FluA、FluB和MP感染无明显季节性，检出率整年均较高；RSV呈现流行高峰在冬、春季；ADV和CP为春、夏季多发；PIV和LP发病率终年较低。随年龄增长RSV发病率下降，而其他病原体则相反。病原体混合感染检出1 627例，占47.01%；混合感染最常见病原体为FluA+FluB和FluA+FluB+MP。结论 淮安地区2015年8种呼吸道病原体阳性率达69.17%，以FluB检出率最高；呼吸道病原体感染的流行季节各有不同；伴随年龄的增长RSV阳性率降低，而其他病原体阳性率则逐步增长；以FluA和FluB的混合感染为最多见；早期检测呼吸道病原体，将有助于儿科医生诊治和控制呼吸道感染。

儿童；急性呼吸道感染；病原体；间接免疫荧光法

Abstract:Objective To investigate respiratory pathogensand seasonalepidemic featuresofacute respiratory tract infections in children so as to provide the basis for effective clinical prevention and treatment.Methods Indirect immunofluorescence assay was utilized to detect serum IgM antibodies against respiratory viruses and atypical pathogens from 3,461 children of 0-12 years with acute respiratory tract infections in our hospital between January 2015 and December 2015.The pathogens includedRespiratory syncytial virus(RSV),Adenovirus(ADV),Influenza A virus(FluA),Influenza B virus(FluB),Parainfluenza virus(PIV),Mycoplasma pneumonia(MP),Chamydophila pneumonia(CP),andLegionella pneumophila(LP).Results Of 3,461 serum samples detected,the total IgM positive rate of respiratory tract infection pathogens was 69.17%.The most frequently detected pathogens were FluB (51.11%),FluA (36.38%),MP (25.14%)and RSV (9.04%).The detection rates of FluA,FluB and MP infections did not exhibit a pronounced seasonality and kept at a high level almost throughout the year.RSV epidemic peak appeared in winter and spring.ADV and CP had higher detection rates in spring and summer.PIV and LP kept at a low level throughout the year.While RSV incidence decreased significantly along with the age growth,the opposite was observed for infections of other pathogens.Mixed-infections of pathogens were detected in 1,627 cases with the positive rate of 47.01%.The most common pathogens in the co-infections were FluA+FluB and FluA+FluB+MP.Conclusions The total positive rate of 8 kinds of respiratory pathogens was 69.17%in Huaian in 2015,andthe positive rate of FluB was the highest.The incidences of the infections caused by the respiratory pathogens varied in the seasons.With the growth of the age,the positive rate of RSV was significantly decreased,while the positive rates of other pathogens were gradually increased.FluA and FluB were the most common in mixed infections.Early detection of respiratory pathogens will be helpful for pediatricians to diagnose,treat and control respiratory tract infections.

Keywords:children;acute respiratory tract infection;pathogen;indirect immunofluorescence

急性呼吸道感染（acute respiratory infection，ARI）是儿科常见的感染性疾病，在发展中国家更是对儿童健康主要的、严重的威胁。病毒、非典型性病原体是引发ARI的多见病因[1-3]。本研究检测2015年淮安地区本院儿科门诊和住院3 461例ARI儿童血清8种呼吸道病原体免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）抗体，并分析其检测结果，旨在探讨本地区儿童急性呼吸道感染的病因，更深刻地了解各种呼吸道病原体的流行特点，指导儿科实施早期临床诊治和控制呼吸道感染。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2015年1月-2015年12月南京医科大学附属淮安第一医院儿科门诊和住院ARI患儿3 461例。其中，男性2 236例，女性1 225例；年龄0～12岁；年龄 ＜1岁组1 215例，1～＜3岁组 977例，3～＜6岁组 676例，6～12岁组 593例。

1.2 实验仪器与试剂

低速台式离心机为北京时代北利离心机有限公司产品，EUROStarⅢ增强型荧光显微镜由德国吕贝克EUROIMMUN公司提供，8种呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒（间接免疫荧光法）由德国欧蒙医学实验诊断股份公司提供。

1.3 方法

1.3.1 标本采集 取患儿外周静脉血2 ml，3 500 r/min离心5 min，留取血清。

1.3.2 呼吸道病原体谱IgM抗体检测 采用间接免疫荧光法同时检测血清中的呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）、腺病毒（Adenovirus，ADV）、甲型流感病毒（fluenza A virus，Flu-A）、乙型流感病毒（influenza virusB，FluB）、副流感病毒（parainfluenza virus，PIV）、肺炎支原体（mycoplasma pneumonia，MP）、肺炎衣原体（chamydophila pneumonia，CP）、嗜肺军团菌 （legionella pneumophila，LP）IgM抗体，严格按试剂说明书进行操作。将稀释的患儿血清与包被有检测基质的载片温育，如果样本阳性，特异性IgM抗体与相应抗原结合；在第二步温育时，结合的抗体与荧光素标记的抗人免疫球蛋白抗体反应，然后在荧光显微镜下观察特异性的荧光模型。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 22.0统计软件，计数资料以率表示，用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 呼吸道病原体I gM抗体阳性率

3 461例患儿血清中检出呼吸道病原体IgM抗体阳性2 394例，总阳性率为69.17%；其中FluB IgM检出阳性率居首位，达51.11%，其他依次为FluA、MP、RSV、ADV、PIV、CP及 LP。见表 1。

表1 8种呼吸道病原体I gM抗体阳性检出率

2.2 呼吸道感染病原体季节分布

FluA、FluB及MP感染无明显季节性，整年均表现出高发趋势；RSV感染高峰在冬、春季；ADV和CP为春、夏季多发；PIV和LP发病率终年较低。见表2。

2.3 呼吸道病原体I gM抗体不同月份分布

FluA、FluB及MP感染终年阳性检出率均较高，FluA于3～6月多发，FluB高峰呈现于10和11月份，MP以1和5月份多见，RSV好发于1、4和5月份，ADV在5和7月份高发，PIV、CP、LP检出率整年均较低。见图1。

表2 不同季节8种呼吸道病原体I gM抗体检出阳性率 例（%）

图1 不同月份8种呼吸道病原体I gM抗体分布情况

2.4 不同年龄段患儿呼吸道病原体I gM抗体检出情况

年龄 ＜1岁、1～＜3岁、3～＜6岁及 6～12岁阳性检出率分别为41.23%、72.88%、93.05%及92.24%，组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。8种呼吸道病原体IgM抗体阳性率在各年龄段之间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。伴随年龄的增长，RSV阳性率降低，而其他病原体IgM抗体阳性率则逐步增长。见表3和图2。

2.5 呼吸道病原体混合感染情况

同时检出≥2种病原体混合感染的患儿1 627例，占47.01%；FluA+FluB 2种病原体混合感染的构成比最高，达33.56%，其次是FluB+MP，占10.02%；3种病原体多重感染中以FluA+FluB+MP为最多，占22.50%，其次是 ADV+FluA+FluB，占 2.95%；4种病原体多重感染以FluA+FluB+MP+CP为最多，占1.91%；5种病原体混合感染中以ADV+FluA+FluB+MP+CP为最多，占0.25%；其余模式混合感染构成比均较低，占7.68%。见表4。

表3 不同年龄段患儿呼吸道病原体I gM抗体检出情况 例（%）

图2 不同年龄段患儿呼吸道病原体I gM抗体检出情况

表4 呼吸道病原体混合感染的分布情况 例（%）

续表4

3 讨论

儿童急性呼吸道感染发病急，病情进展迅速，容易反复，可导致多系统、多器官的损伤[4]，症象轻重不一，临床难以区分[5-8]，因而呼吸道病原的实验室检测有助于儿科医生做出早期诊断及对应治疗方案。

作为近期感染标志的特异性抗体是IgM，近年临床广泛利用血清呼吸道病原体特异性IgM抗体检测，以达到对儿童急性呼吸道感染快速早期诊断的目的[9]。本研究使用德国欧蒙公司研发的间接免疫荧光技术，同时检测血清8种常见呼吸道病毒及非典型病原体特异性IgM抗体。该方法具备快速检测、简易操作、荧光结果稳定可信、低成本等优势，相宜临床儿科须要[10]。

本研究表明，3 461例急性呼吸道感染患儿血清8种呼吸道病原体特异性IgM阳性率为69.17%，相对低于有关文献报道[11-12]。FluA、FluB、MP及RSV是引发淮安地区儿童急性呼吸道感染的首要病原体。呼吸道病原体感染状况于不同的季节和不同的月份有差异。研究结果显示，FluA、FluB及MP感染无明显季节性，呈现出整年高发趋向；RSV感染高峰在冬春季，与FABBIANI等[13]报道相似，并于1和4月份各出现一检出高峰，阳性率分别达11.68%和13.54%；ADV和CP均为春夏季多发，ADV于5和7 2个月份阳性率最高，阳性率分别为10.74%和14.22%，与LI等[14]研究发现，ADV伴随温度的升高而感染增加的结论相一致，而CP于5和6月份检出率最高，分别为8.26%和7.24%；PIV和LP发病率终年较低。该项研究结果不与全国其他地区一致，这或许是呼吸道感染病原体在方法论、人群易感性及不同地域、年份、环境气候等流行病学特征差异的缘故[12]。

本研究发现，8种呼吸道病原体IgM抗体阳性率在不同的年龄段间比较有差异，伴随年龄的不断增长RSV阳性率降低，而其他病原体IgM抗体阳性率则在逐步增高。在年龄＜1岁和1～＜3岁年龄患儿RSV检出阳性率最高，分别为19.09%和5.63%，与国内外研究报道的RSV是引发婴幼儿呼吸道感染的主要病原体结论一致[15-18]。除RSV外的7种呼吸道病原体感染在学龄前和学龄期较婴幼儿时期阳性检出率高，也许是源于母亲的抗体在学龄前和学龄期荡然无存，幼儿园、学校的活动范围逐渐增大，自身免疫系统跟着年龄的增长而逐步发育完善，特异性IgM抗体可在呼吸道病原体感染后充足产生，而造成发病率增高。

本研究显示，同步检测出≥2种病原体的多重感染患儿占44.87%；2种病原体混合感染以FluA+FluB多见，其次是FluB+MP，与PENG等[19]报道结论一致；3种病原体多重感染以FluA+FluB+MP最多，其次是ADV+FluA+FluB；4种病原体混合感染FluA+FluB+MP+CP较多见。造成多重感染的源由或许为某一种病原体感染后破坏呼吸道黏膜，呼吸系统免疫功能低下，促使其他病原体更轻易乘虚而入，引致继发感染或交叉感染。

儿童呼吸道感染仍然是一个全世界范围关注的健康问题。由于根据急性呼吸道感染患儿所表现出的临床症状通常是不能区分病因为病毒或非典型病原体的感染，所以快速可靠的诊断工具将有利于更好地进行抗生素管理和执行适当的感染控制措施[20]。综上所述，本研究利用间接免疫荧光法检测8种血清呼吸道病原体IgM抗体，不仅提供本地区儿童急性呼吸道感染的病因学证据，而且拓展对儿童ARI病原体流行病学特点的了解，将有助于儿科医生更有效地诊治和控制呼吸道感染。

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（童颖丹 编辑）

Etiology of acute respiratory tract infections in children in Huaian

Yuan-yuan Zhang
(Clinical Laboratory,Huaian First People's Hospital,Nanjing Medical University,Huaian,Jiangsu 223300,China)

R725.6

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.23.020

1005-8982（2017）23-0095-05

2016-05-31