许宗丽，黄溢泓，李志源，刘针伶，周师师，覃艳然，邱 洁，盘美妮

（柳州市动物疫病预防控制中心，广西柳州 545000）

猪伪狂犬病病毒LAMP可视化检测方法的建立

许宗丽，黄溢泓，李志源，刘针伶，周师师，覃艳然，邱 洁，盘美妮

（柳州市动物疫病预防控制中心，广西柳州 545000）

根据GenBank中猪伪狂犬病病毒（PRV）gB基因的保守序列，设计一套特异性引物，在对反应条件进行优化后，建立了PRV环介导等温扩增（LAMP）可视化检测方法。结果显示：该方法能在常规65 ℃水浴锅中30 min内实现对目的片段的特异性扩增，并且可通过肉眼观察颜色直接判定检测结果；该方法具有很高的特异性，与猪瘟病毒、猪圆环病毒2型等均无交叉反应；该方法的敏感性可达1 fg；将该方法应用于临床样品检测，结果与普通PCR方法一致。研究表明，本研究建立的LAMP方法简便、快速、灵敏、特异，适合基层PRV感染的快速检测。

猪伪狂病病毒；环介导等温扩增（LAMP）；检测

Abstract：According to the sequences of PRV gB gene in GenBank，a set of primers was designed. After the optimization of the reaction conditions，a visualized LAMP for PRV was established. The results showed that the optimized detection assay could be conducted by incubating in the conventional water bath at 65℃ for 30min，and the result could be directly determined by visual observation. The assay was specific to PRV with a detection limit of 1 fg，and no crossreactivity with other pathogens of swine，including CSFV and PCV2. The results of detection of clinical samples by our LAMP approach were consistent with that of the ordinary PCR assay. These results suggested that the LAMP assay described in this study was a simple，rapid，specific method for detection of PRV in the field.

Key words：Pseudorabies virus；LAMP；detection

伪狂犬病（PR）是一种以急性脑脊髓炎、发热以及奇痒（猪除外）等为主要临床症状的急性传染病，由伪狂犬病病毒（PRV）引起，可危害多种家畜和野生动物[1-2]。猪是PRV的传染源和自然宿主，感染后表现为发热，仔猪还表现神经症状和高死亡率，大中猪表现呼吸症状，母猪出现流产、产死胎、不育等临床特征[3]。据邓仕伟等[4]统计，2006年该病在我国29个省、香港特别行政区及台湾发生。目前，PR的流行出现上升趋势，成为养猪业中危害严重的疫病之一。

环介导等温扩增技术（LAMP）是一种新型核酸扩增技术，由Notomi等[5]于2000年研发成功。……