杨意，朱向东，翟艳会，李婷

(甘肃中医药大学，兰州730000)

痛泻要方对肝郁脾虚型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中gp130、SOCS3表达的影响

杨意，朱向东，翟艳会，李婷

(甘肃中医药大学，兰州730000)

目的观察痛泻要方对肝郁脾虚型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠组织中糖蛋白130(gp130)、细胞因子信号传导抑制蛋白3(SOCS3)基因和蛋白表达的影响。方法将60只大鼠随机分为A、B、C、D组各15只，B、C、D组均采用三硝基苯磺酸/乙醇溶液+束缚应激、饮食失节法行肝郁脾虚型UC造模，A组采用同样方法用等量的生理盐水灌肠。C、D组分别予以痛泻要方 (生药5.5 g/kg)、美沙拉秦(0.5 g/kg)灌胃10 mL/kg，A、B组灌服等体积生理盐水。各组造模成功后第1天开始灌胃，1次/d，连续21 d。取出距肛门以上7～8 cm处结肠段，肉眼行结肠黏膜损伤评分，分别采用Real-time荧光定量PCR法及免疫组化、免疫印迹法检测结肠组织中的gp130、SOCS3基因和蛋白。结果B组结肠黏膜损伤评分为(2.67±0.62) 分，高于A组的(0.6±0.63)分(P<0.01)；C、D组分别为(1.73±0.70)、(1.27±0.46)分，均高于B组(P均<0.01)；C、D组间比较无统计学差异。B组较A组结肠组织中gp130基因和蛋白表达升高、SOCS3基因和蛋白表达降低(P均<0.05)，C、D组较B组结肠组织中gp130基因和蛋白表达降低、SOCS3基因和蛋白表达升高(P均<0.05)，C、D组结肠组织gp130、SOCS3基因和蛋白比较无统计学差异。结论痛泻要方可下调gp130表达、上调SOCS3表达，从而有效降低肝郁脾虚型UC大鼠结肠黏膜损伤程度。

溃疡性结肠炎；痛泻要方；美沙拉秦；糖蛋白130；细胞因子信号传导抑制蛋白3；大鼠

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 SPF级Wistar大鼠60只，体质量(180±10)g，雌雄各半，由甘肃中医学院科研实验动物中心提供。

1.1.2 实验试剂 三硝基苯磺酸(TNBS，Sigma公司)；美沙拉秦缓释颗粒剂(5-ASA，爱的发制药公司)。痛泻要方(惠仁堂大药房，由甘肃中医药大学药剂科鉴定为真品)。TRIzol试剂(美国 Invitrogen 公司)；反转录试剂盒、PCR试剂盒、扩增试剂盒(Promega 公司)。浓缩型DAB底物液、DAB溶液、兔SP试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)；SDS-PAGE凝胶试剂盒(Solarbio公司)；gp130一抗、SOCS3一抗(Abcam公司)。

1.1.3 仪器与设备 Biorad iMark酶标仪、CFX96 Real-time荧光定量PCR仪(BIO-RAD公司)；通用台式高速离心机(Sigma3-16PK型)；……