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碳黑和碳黑与铅复合物对人肺腺癌细胞A549毒性作用的比较

2017-09-23温海燕高祥志姜双林

宿州学院学报 2017年7期
关键词:检测

木 魁,姜 楠,温海燕,李 响,高祥志,姜双林

阜阳师范学院1.生命科学学院,2.胚胎发育与生殖调节安徽省重点实验室,阜阳,236037

碳黑和碳黑与铅复合物对人肺腺癌细胞A549毒性作用的比较

木 魁1,2,姜 楠1,2,温海燕1,2,李 响1,2,高祥志1,姜双林1,2

阜阳师范学院1.生命科学学院,2.胚胎发育与生殖调节安徽省重点实验室,阜阳,236037

【目的】比较碳黑和碳黑与铅复合物对人肺腺癌细胞A549的氧化损伤和凋亡方面的毒性。【方法】分别将浓度为40 μg/mL的碳黑和碳黑与铅的复合物(硝酸铅∶碳黑为250 ng∶1 g)暴露A549细胞,MTT法测定24、48、72 h时的细胞毒性;检测细胞上清中乳酸脱氢酶(LDH)活力,胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的活性和总蛋白含量;荧光染色法检测细胞产生的活性氧(ROS)的含量;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡。【结果】处理组暴露24 h后A549细胞的存活率均降低,碳黑与铅复合物最低,处理48 h和72 h与处理24 h的趋势一致;处理组LDH和MDA均显著高于对照组(P<0.05),其中碳黑与铅复合物最高;处理组CAT活性、SOD活性和GSH-Px含量均显著低于对照组(P<0.01),碳黑与铅复合物最低;碳黑处理组ROS高于对照组,碳黑与铅复合物处理组ROS最高;碳黑处理组凋亡率是空白组的2.73倍,碳黑与铅复合物处理组凋亡率是对照组的4倍。【结论】碳黑与铅复合物和碳黑对A549细胞均产生细胞毒性,导致胞内抗氧化酶下降,细胞凋亡率增高,碳黑与铅复合物比碳黑对A549细胞具有更强的毒性损伤。

碳黑;A549;毒性

我国黑碳颗粒的排放约占全球的四分之一,总量达到181.1×104t[1-2]。黑碳颗粒是PM2.5的主要组分之一,也是PM2.5传输和吸附有毒有害物质的载体,能诱发呼吸系统疾病的发生[3]。它的孔隙发达,粒径小,比表面积大,能极强地吸附重金属离子(如Pb、Cd、Zn、Mn、Cr等),形成黑碳-污染物复合体[4]。

空气中的铅主要来源于燃油和燃煤排放,它与空气中的黑碳结合,形成二次黑碳粒子,即黑碳与铅复合物。Liu等通过黑碳(一次性黑碳)暴露于O3后制备的二次黑碳(黑碳-臭氧复合体),氧化损伤和细胞毒性效应明显增强[5]。……

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