浦香东，王丽芝

(天津中医药大学中药学院，天津 300193)

·基础研究·

丹参酮合成相关的候选基因CYP76AK5克隆及生物信息学分析△

浦香东，王丽芝1*

(天津中医药大学中药学院，天津300193)

目的：基于丹参基因组和转录组筛选、克隆及分析丹参酮合成途径候选的CYP450编码基因。方法：设计引物克隆SmCYP76AK5编码基因，通过MEGA软件构建系统进化树并结合实时定量PCR分析其在根不同组织(周皮、韧皮部、木质部)、根、茎、叶、花中的差异表达；最后利用在线生物信息学工具分析其理化性质，预测其二级结构、保守结构域等。结果：系统进化树分析表明SmCYP76AK5属于CYP71clan；基因差异表达显示SmCYP76AK5在根周皮中表达最高，与丹参酮的合成和积累相一致。结论：预测丹参SmCYP76AK5参与丹参酮的生物合成。

丹参；丹参酮；生物合成；SmCYP76AK5；差异表达

药用植物次生代谢产物是天然药物的主要来源，萜类化合物在植物天然产物中种类最多，如能够有效治疗癌症的紫杉醇和治疗疟疾的青蒿素等。丹参为唇形科鼠尾草属多年生草本植物丹参SalviamiltiorrhizaBunge的干燥根和根茎，在心脑血管疾病诊疗中效果显著，丹参酮类化合物是其重要的活性成分之一[1-5]。以丹参酮为主要成分的复方丹参滴丸于2016年3月16日顺利提前完成美国食品和药品管理局(Food and Drug Administration，FDA)三期临床试验，届时将成为首例获得美国FDA认证的复方中药。由于其重要的药理价值及资源需求，丹参酮生源途径的解析得到国内外的广泛关注。丹参作为药用模式植物，对其丹参酮生物合成途径分子机制的解析具有重要的科学意义和应用价值[6]。……