王立平 马新福 张 鹏 殷 麟 赵 兴

(青海大学附属医院肿瘤放疗科，青海 西宁 810001)

放疗对结肠癌肝转移患者血清基质金属蛋白酶-2和-9表达的影响

王立平 马新福1张 鹏2殷 麟 赵 兴

(青海大学附属医院肿瘤放疗科，青海 西宁 810001)

目的观察放疗对结肠癌肝转移患者血清中基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达的影响，分析其在有无腹水患者中的表达差异。方法观察组为34例结肠癌肝转移患者，在常规化疗基础上加用放疗。选择同期经病理学确诊为结肠癌无血道和淋巴结转移30例为对照组。于治疗前及治疗8 w后抽取空腹静脉血。选择同期经体检证实为无明显器质性疾病的成人血清标本28例作为正常对照组。应用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测3组血清中MMP-2和MMP-9的表达。结果观察组、对照组治疗前、治疗后和正常对照组血清中MMP-2、MMP-9表达的差异有统计学意义(P<0.05)，观察组治疗后血清中MMP-2和MMP-9的下降值明显高于对照组(P<0.05)。观察组有腹水组中治疗后血清中MMP-2和MMP-9的下降值明显高于无腹水组(P<0.05)。结论放疗对结肠癌伴有肝转移患者有一定的作用，同时能有效下调血清中MMP-2和MMP-9表达，对有腹水患者血清中MMP-2和MMP-9表达的调节可能更明显。

结肠癌；肝转移；放射治疗；基质金属蛋白酶-2；基质金属蛋白酶-9

结肠癌可以发生肝转移，部分患者适合手术治疗，部分患者不适合手术治疗〔1,2〕，无论哪种情况，放、化疗均有一定价值。基质金属蛋白酶(MMP)-2和-9是MMPs家族中的重要成员，肿瘤在进展时分泌较多，对病变形成和进展有一定促进作用，尤其是转移灶的形成〔3,4〕。本文观察结肠癌伴有肝转移患者血清中MMP-2和MMP-9的表达，关注放疗对其影响。

1 资料与方法

1.1临床资料 2014年2月至2016年8月我院确诊为结肠癌伴有肝转移患者34例为观察组，纳入均经病理学确诊，并有影像学证据。排除标准：①伴有其他内脏器官严重疾病；②近3个月有严重感染的患者。其中男19例，女15例，年龄48～84岁，平均(59.3±8.7)岁。同期经病理学确诊为结肠癌无血道和淋巴结转移的患者30例作为对照组，其中男16例，女14例，年龄46～80岁，平均(56.7±8.8)岁。同期经体检证实为无明显器质性疾病的成人血清标本28例作为正常对照组，其中男14例，女14例，年龄41～68岁，平均(52.4±7.3)岁。三组一般资料无明显差异，具有可比性。

1.2治疗方法 观察组19例选择手术治疗，术后应用化疗和放疗，其余15例均化疗和放疗。放疗瘤床剂量为60～70 Gy，于放疗第1周和放疗最后1 w进行化疗。奥沙利铂联合输注5-氟尿嘧啶(FU)/亚叶酸(FOLFOX)，奥沙利铂(130 mg/m2)静脉滴注2 h，第1天；亚叶酸钙100 mg，第1～5天；5-FU 500 mg/m2，静脉滴注6 h以上，第1～5天。对照组均行手术治疗，其中11例术后应用化疗，FOLFOX，均1～6〔平均(3.3±0.6)〕个疗程，其余19例术后未进行任何放、化疗。

1.3MMP-2和MMP-9检测 确诊后(治疗前)、治疗8 w后抽取空腹静脉血3 ml，正常对照组常规抽取空腹静脉血，离心，分离血清后冻存。MMP-2和MMP-9的检测均应用酶联免疫吸附(ELISA)法，冻存的样本均于2个月内集中检测，操作均由同一检验师进行，按说明书操作，做好质控工作。

1.4统计学方法 应用SAS6.12统计软件进行t检验、方差分析。

2 结 果

2.13组血清MMP-2和MMP-9表达 见表1。观察组、对照

表1 观察组和对照组治疗前、后与正常对照组血清中MMP-2和MMP-9表达的比较(μg/L,±s)

与治疗前比较：1)P<0.05；表2同组和正常对照组于治疗前、治疗后MMP-2、MMP-9表达的差异均有统计学意义，但是观察组治疗后MMP-2和MMP-9的下降值明显高于对照组(P<0.05)。

2.2观察组是否伴有腹水患者治疗前、后血清中MMP-2和MMP-9变化 观察组治疗前伴有腹水患者血清中MMP-2和MMP-9的表达明显高于不伴有腹水患者，治疗后MMP-2和MMP-9的表达均下降，但是伴有腹水组血清中MMP-2和MMP-9的下降值明显高于不伴有腹水组(P<0.05)。见表2。

表2 观察组是否伴有腹水患者治疗前、后血清中MMP-2和MMP-9变化的比较(μg/L,±s)

3 讨 论

结直肠癌出现肝转移即代表肿瘤处于Ⅳ期，其5年生存率仅为6%，部分局限于肝脏的患者经手术切除后，5年生存率可达25%～40%〔5〕。因此这些患者手术治疗也是治疗方法之一。对于肝脏和肝外转移的晚期患者，缓解症状、提高生活质量是主要的〔6〕。合并梗阻、出血、穿孔的患者需行紧急手术治疗。结肠癌在病变形成中是细胞异型增生的结果，其进展过程涉及转移相关蛋白的作用〔7,8〕。MMPs是与转移相关的蛋白，正常机体中的表达较少，在肿瘤性病变进展时肿瘤细胞分泌和合成增多，主要是对细胞外基质和基底膜进行降解。由于细胞外基质和基底膜是肿瘤转移的屏障，正常情况下对肿瘤细胞的转移有一定抑制作用。当此屏障作用减弱或消失后，肿瘤细胞易于迁移〔9,10〕。MMP-2和MMP-9是家族中的经典成员，其作用强，也是重要转移蛋白〔11〕。当肿瘤细胞分泌MMP-2和MMP-9增多时，两种蛋白可以进入血液循环，使血清中的表达升高〔12〕。结肠癌肝转移患者常是血道播散的结果〔13〕，部分患者可以伴有腹水的形成，主要与慢性肝功能受损使白蛋白合成减少或门静高压等原因有关，结肠癌腹水出现是结肠癌已进入晚期的标志之一〔14,15〕。本研究提示MMP-2和MMP-9是肿瘤进展中的重要促进因子，二者高表达提示肿瘤处于进展状态。MMP-2和MMP-9在肿瘤进展中分泌增加，对破坏基底膜和细胞外基质有重要作用，此时细胞呈现出易于迁移的状态，迁移的细胞体积小，游动性大〔16〕。放疗的作用主要表现为对肿瘤细胞增殖的影响，也表达在抑制肿瘤细胞的迁移过程中〔17〕。本研究提示放疗可抑制结肠癌肝转移患者腹水的形成。恶性腹水是结肠癌晚期常见的并发症，放疗可以减轻腹水的形成，有利于消除全身性肿瘤转移灶及局部原发灶，较单纯化疗可能有更好的疗效。放疗时可以破坏癌细胞的结构和功能〔18,19〕，改变癌细胞的pH值，抑制DNA合成和修复，影响蛋白质的合成〔20,21〕，诱导凋亡的形成，减少转移相关蛋白的产生〔22〕。

综上，放疗对结肠癌晚期伴有肝转移患者有一定的作用，同时能有效下调血清中MMP-2和MMP-9，其对有腹水患者的疗效可能更明显。

1李志锋,石荣亚,孙明德,等.结肠癌患者术后肝转移的相关因素分析〔J〕.中西医结合肝病杂志,2016;26(3):176-7.

2刘玉村,陈国卫,万远廉,等.大肠癌肝转移治疗方法的比较〔J〕.中华外科杂志,2001;39(5):337-40.

3Hoikkala S,Paakko P,Soini Y,etal.Tissue MMP-2/TIMP-2-complex are better prognostic factors than serum MMP-2,MMP-9 or TIMP-1 in stage Ⅰ-Ⅲ lung carcinoma〔J〕.Cancer Lett,2006;236(1):125-32.

4Hritz I,Varga Z,Juhasz M,etal.Increased serum MMP-2,MMP-7,MMP-9,TIMP-1 and TIMP-2 levels in colorectal cancer development〔J〕.Gastroenterology,2011;140(5):S343-5.

5王 羊,黎成金,王 烈.结肠癌肝转移基因治疗研究进展〔J〕.医学综述,2007;13(19):1455-7.

6刘宝善,燕 锦,左 明,等.大肠癌肝转移的特点及外科治疗原则〔J〕.中国实用外科杂志,1999;19(10):585-6.

7戴 波.大肠癌肝转移的治疗进展〔J〕.实用肿瘤杂志,2005;20(4):363-6.

8许玉成.大肠癌肝转移机制与规律〔J〕.中国实用外科杂志,1999;19(10):618-9.

9Wang JR,Gan WJ,Li XM,etal.Orphan nuclear receptor Nur77 promotes colorectal cancer invasion and metastasis by regulating MMP-9 and E-cadherin〔J〕.Carcinogenesis,2014;35(11):2474-84.

10Kim EY,Song HY,Kim JC,etal.MMP-9 expression after metallic stent placement in patients with colorectal cancer:association with instent restenosis〔J〕.Radiology,2014;271(3):901-8.

11Langers AM,Verspaget HW,Hawinkels LJ,etal.MMP-2 and MMP-9 in normal mucosa are independently associated with outcome of colorectal cancer patients〔J〕.Br J Cancer,2012；106(9):1495-8.

12Moran A,Iniesta P,García-Aranda C,etal.Clinical relevance of MMP-9,MMP-2,TIMP-1 and TIMP-2 in colorectal cancer〔J〕.Oncol Rep,2005；13(1):115-20.

13Song N,Sung H,Choi JY,etal.Preoperative serum levels of matrix metalloproteinase-2(MMP-2) and survival of breast cancer among Korean women〔J〕.Cancer Epidemiol Biomarkers Prev,2012;21(8):1371-80.

14Brenner H,Kloor M,Pox CP.Colorectal cancer〔J〕.Lancet,2014;383(9927):1490-502.

15成文琴,朱金水,朱 励,等.不同疗法对晚期结肠癌患者癌性腹水和血清中sIL-2R的影响〔J〕.检验医学,2002;17(1):42-3.

16Benard A,Janssen C,van den Elsen P,etal.Chromatin status of apoptosis genes correlates with sensitivity to chemo-,immune- and radiation therapy in colorectal cancer cell lines〔J〕.Apoptosis,2014;19(12):1769-78.

17曹亚丽,陈 琳,吴月平.结肠癌患者放疗和化疗前后血小板参数的变化及意义〔J〕.检验医学与临床,2011;8(22):2768-9.

18刘思涵,张大昕,宋颖辉.PPARγ与放射治疗联合应用的前景〔J〕.现代生物医学进展,2012;12(29):5786-8.

19Samiee S,Ahmed S,Hui K,etal.Colorectal cancer screening in cancer survivors treated with radiation therapy〔J〕.Int J Radiation Oncol Biol Phys,2014;90(1):716.

20Barker HE,Paget JT,Khan AA,etal.The tumour microenvironment after radiotherapy:mechanisms of resistance and recurrence〔J〕.Nature Rev Cancer,2015;15(7):409-25.

21Ruokolainen H,Paakko P,Turpeenniemi-Hujanen T.Serum matrix metalloproteinase-9 in head and neck squamous cell carcinoma is a prognostic marker〔J〕.Int J Cancer,2005;116(3):422-7.

22Yang ZH,Li SN,Liu JX,etal.MMP-9 polymorphisms are related to serum lipids levels but not associated with colorectal cancer susceptibility in Chinese population〔J〕.Mol Biol Rep,2012;39(10):9399-404.

〔2016-10-17修回〕

(编辑 苑云杰)

赵 兴(1965-)，男，主任医师，主要从事肿瘤放射治疗研究。

王立平(1973-)，女，硕士，副主任医师，主要从事肿瘤放射治疗研究。

R73

A

1005-9202(2017)16-4008-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.16.045

1 青海大学附属医院胃肠外科 2 青海大学附属医院介入科