徐 海,宋 波,樊小雪,袁希汉,陈龙正

(江苏省农业科学院 蔬菜研究所,江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室,江苏 南京 210014)

不结球白菜耐热相关基因BcPLDγ的克隆和表达分析

徐 海,宋 波,樊小雪,袁希汉,陈龙正*

(江苏省农业科学院 蔬菜研究所,江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室,江苏 南京 210014)

以不结球白菜耐热自交系‘高华青’、‘苏州青’和热敏自交系‘矮脚黄’为试验材料,利用RACE技术克隆得到不结球白菜BcPLDγ基因,利用生物信息学方法对该基因进行信息学分析,并采用qRT-PCR 技术对热胁迫处理条件下不结球白菜叶片BcPLDγ基因的表达模式进行了研究.结果显示,BcPLDγ基因的cDNA全长为2736 bp,其中开放阅读框长度为1905 bp,共编码634个氨基酸.该蛋白不存在信号肽序列,预测相对分子量为71.59 kD,理论等电点为6.73.BcPLDγ蛋白的二级结构主要由α-螺旋、延伸直链、β-转角和无规则卷曲4种形式构成.该蛋白含有一个植物PLD特有的C2结构域和一个PLDc结构域.系统进化分析表明BcPLDγ蛋白与同属植物的进化关系相近,其中与甘蓝型油菜进化关系最近.热胁迫处理条件下,3份试验材料中BcPLDγ基因表达均显著上调,并于12 h时达到峰值,且上调趋势与试验材料的耐热性呈正相关.

不结球白菜;耐热;BcPLDγ;基因表达

磷脂酶D(Phospholipase D,简称PLD)是一种水解磷脂的酶类,普遍存在于各类植物中,可通过水解磷脂酰胆碱生成磷脂酸,在植物的新陈代谢和细胞信号转导过程当中扮演了不同的角色.已有研究表明,PLD参与了植物中细胞生长、细胞凋亡、细胞……