STAT3/AKT信号通路在结肠癌细胞HT-29顺铂耐药中的作用
2017-09-12于红刚
张 军,安 萍,沈 磊,黄 旭,李 明,于红刚
武汉大学人民医院消化内科,湖北武汉430060
STAT3/AKT信号通路在结肠癌细胞HT-29顺铂耐药中的作用
张 军,安 萍,沈 磊,黄 旭,李 明,于红刚
武汉大学人民医院消化内科,湖北武汉430060
目的 探讨STAT3/AKT信号通路在结肠癌细胞中对顺铂化疗敏感的影响。方法 以结肠癌细胞HT-29为研究对象,应用化疗药物顺铂并设定一系列梯度浓度及不同的时间点处理对数期生长的结肠癌细胞HT-29,利用Real-Time PCR检测AKT的表达。应用顺铂和活性氧抑制剂NAC单独及联合应用处理HT-29细胞后测定细胞中活性氧水平及STAT3、AKT及磷酸化磷酸化STAT3的表达水平,应用STAT3抑制剂处理结肠癌细胞后检测AKT的表达。结果 应用顺铂处理结肠癌细胞后,活性氧产生增加;AKT在转录水平的表达与顺铂呈浓度依赖性,其在4 h时表达水平最高;单用顺铂组中STAT3及AKT的活性高于联合用药组;应用STAT3抑制剂后AKT的表达下调。结论 应用活性氧抑制剂通过阻断STAT3/AKT信号途径提高结肠癌细胞对顺铂化疗的敏感性。
顺铂;结肠癌;活性氧;STAT3;AKT
我国结肠癌发病率与病死率都非常高,虽然临床治疗肿瘤的方法不断更新,但顺铂等化疗药物仍是目前较为常用的药物,但因其耐药性等不良反应而限制其临床进一步广泛应用[1]。本课题组前期研究[2]提示,顺铂等化疗药物可以导致AKT表达水平的增加,提示其耐药性的产生可能与此有关。本实验以结肠癌细胞HT29为研究对象,初步探讨顺铂联合活性氧抑制剂NAC对降低结肠癌顺铂耐药性影响。
1 材料与方法
1.1 材料 结肠癌细胞HT29购自中国科学院上海细胞研究所细胞库,AKT抗体、STAT3抗体及p-STAT3抗体均购自CST公司,顺铂及WP1066购自美国Sigma公司。……
