曹敏 黄林

磷霉素对肠杆菌科细菌的抗菌作用研究

曹敏 黄林

目的 评价磷霉素对肠杆菌科细菌的抗菌作用。方法 收集3家医院2012年1月到2014年6月非重复分离的150株肠杆菌科细菌，包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和粘质沙雷菌各50株，其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和粘质沙雷菌各包括25株碳青霉烯敏感株和25株碳青霉烯耐药株，用琼脂稀释法测定磷霉素药敏。结果 150株肠杆菌科细菌对磷霉素的耐药率为25.3%，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、粘质沙雷菌对磷霉素的耐药率分别为2.0%、48.0%、26.0%；大肠埃希菌中碳青霉烯敏感株与碳青霉烯耐药株磷霉素耐药率分别为4.0%和0%，肺炎克雷伯菌中碳青霉烯敏感株与碳青霉烯耐药株磷霉素耐药率分别为0%和56.0%，粘质沙雷菌中碳青霉烯敏感株与碳青霉烯耐药株磷霉素耐药率分别为20.0%和24.0%。 结论 磷霉素对肠杆菌科细菌体外有较好的抗菌活性。

磷霉素 肠杆菌科细菌 抗菌作用

肠杆菌科细菌是临床常见条件致病菌，近年来随着抗生素的广泛应用，多重耐药菌已经越来越常见并成为关注的焦点。针对多重耐药菌，能够应用的抗生素已经越来越少，但新药从开发到用于临床需要经历一个漫长的过程。磷霉素通过抑制细菌细胞壁合成的早期阶段，对革兰阴性菌和革兰阳性菌均有活性，是一种广谱抗生素。磷霉素主要用于非复杂性尿路感染[1]，作为一种老抗生素，磷霉素的耐药率并不高。笔者对临床分离的肠杆菌科细菌检测磷霉素的体外抗菌作用，现将结果报道如下。

1 材料和方法

1.1 菌株来源 150株肠杆菌科细菌分别来自浙江大学医学院附属第二医院（105株）、杭州市中医院（19株）、浙江省人民医院（26株）2012年1月至2014年6月的门诊和住院患者，均为非重复分离株。

1.2 仪器与试剂 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪（MALDI-TOF MS）（德国Bruker公司）；VITEK 2 COMPACT全自动细菌鉴定和药敏系统（法国生物梅里埃公司）；多点接种仪（日本ORIENTAL MOTOR公司）；亚胺培南、美罗培南、磷霉素（200μg）药敏纸片（英国OXOID公司）；磷霉素干粉（哈药集团三精制药股份有限公司）；6-磷酸葡萄糖（美国Sigma公司）。

1.3 细菌鉴定和药敏 全部菌株经VITEK 2 COMPACT鉴定到种，再经MALDI-TOF MS进行菌种确认，质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922。纸片法（亚胺培南和美罗培南）测定所有菌株碳青霉烯敏感性，同时采用CLSI推荐的琼脂稀释法测定磷霉素对所有菌株的MIC[2]。按照CLSI标准进行MIC测定时培养基中加入25mg/L的6-磷酸葡萄糖。

1.4 结果判读 参照CLSI M100-S24[2]标准判读，磷霉素对肺炎克雷伯菌和粘质沙雷菌的折点参照大肠埃希菌[2]。

1.5 统计学处理 应用SPSS13.0统计软件，计数资料的比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 磷霉素的抗菌活性 150株肠杆菌科细菌对磷霉素耐药率的95%CI是18.6%~33.1%，详见表1。大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药率、大肠埃希菌与粘质沙雷菌耐药率、肺炎克雷伯菌与粘质沙雷菌耐药率比较差异均有统计学意义（χ2=28.213、11.960、5.191，均P＜0.05）；磷霉素对大肠埃希菌、粘质沙雷菌、肺炎克雷伯菌的敏感性依次递减。

表1 磷霉素对所有菌株的抗菌活性

2.2 磷霉素MIC分布情况 磷霉素对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、粘质沙雷菌的MIC分布见图1，大肠埃希菌的磷霉素MIC分布较肺炎克雷伯菌和粘质沙雷菌集中且主要集中在1μg/ml以下的低浓度区域。

图1 所有菌株磷霉素M I C分布情况

2.3 碳青霉烯耐药株与碳青霉烯敏感株磷霉素耐药率比较 150株肠杆菌科细菌纸片法测得大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、粘质沙雷菌各50株分别各自包括25株碳青霉烯耐药株（CRE）和25株碳青霉烯敏感株（CSE）。其中肺炎克雷伯菌碳青霉烯敏感株与碳青霉烯耐药株磷霉素耐药率为0%和56%，差异最大。详见表2。

表2 碳青霉烯耐药株与碳青霉烯敏感株磷霉素耐药率比较

3 讨论

磷霉素通过抑制细菌细胞壁肽聚糖合成的起始阶段，属于杀菌剂，对革兰阳性菌和革兰阴性菌均有作用[3]。由于其抗菌作用部位的特殊性，很少与其他抗生素产生交叉耐药[1]。在CLSI规则里，磷霉素属于O组药物，并且只有大肠埃希菌和粪肠球菌（尿路感染）折点，导致其在美国使用率较低。但是在澳大利亚、德国、法国、西班牙等国家，磷霉素还被用于组织感染、血流感染，并取得不错的效果[4]。

本文研究磷霉素对150株肠杆菌科细菌的抗菌活性，测得磷霉素的耐药率（95%CI）是25.3%（18.6%~33.1%），与文献报道相似[5]。其中，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、粘质沙雷菌对磷霉素的耐药率分别为2%、48%、26%，与文献[6]报道相似。大肠埃希菌磷霉素MIC90只有2μg/ml，敏感性非常好。肺炎克雷伯菌中碳青霉烯耐药株磷霉素耐药率远远高于碳青霉烯敏感株，其机制是由于肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药菌株常常同时携带有blaKPC和fos A基因质粒[7]，所以常常表现为碳青霉烯类与磷霉素的同时耐药，而大肠埃希菌和粘质沙雷菌中碳青霉烯敏感株与碳青霉烯耐药株磷霉素耐药率差异较小。

碳青霉烯类药物耐药肠杆菌科细菌已经越来越常见[8]，对于这类多重耐药菌，磷霉素是少见的还保持着较高敏感性的抗生素[9]。本研究结果显示磷霉素对肠杆菌科细菌体外有较好的抗菌活性，对于临床上由肠杆菌科细菌引起的感染，可以考虑应用磷霉素。

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Antimicrobial susceptibility of Enterobacteriaceae to fosfomycin

CAO Min，HUANG Lin.Department of Clinical Laboratory,the Second Affiliated Hospital of Zhejiang University School of Medicine，Hangzhou 310009，China

Objective To investigate the antimicrobialsusceptibility ofEnterobacteriaceae to fosfomycin.Methods A total of 150 non-repetitive Enterobacteriaceae isolates were collected from the Second Affiliated Hospital of Zhejiang University School of Medicine,Hangzhou Traditional Chinese Medicine Hospital and Zhejiang Provincial People's Hospital between January 2012 and June 2014,including 50 strains of Escherichia coli,50 strains of Klebsiella pneumoniae and 50 strains of Serratia marcescens.Among all these isolates,there were 25 carbapenem-sensitive strains and 25 carbapenem-resistant strains for each bacteria,respectively.Susceptibility of fosfomycin was determined by agar dilution method. Results Overall 25.3%of 150 Enterobacteriaceae isolates were resistant to fosfomycin.The resistance rate of Escherichia coli,Klebsiella pneumoniae and Serratia marcescens was 2.0%,48.0% and 26.0%,and the resistance rate of carbapenem-sensitive strains vs. carbapenem-resistant strains was 4.0%vs.0%,0%vs.56.0%and 20.0%vs.24.0%for Escherichia coli,Klebsiella pneumoniae and Serratia marcescens,respectively. Conclusion Fosfomycin demonstrates certain activity against Enterobacteriaceae in vitro.

Fosfomycin Enterobacteriaceae Antibacterial activity

2 0 1 6-0 5-3 1）

（本文编辑：严玮雯）

d o i:1 0.1 2 0 5 6/j.i s s n.1 0 0 6-2 7 8 5.2 0 1 7.3 9.1 5.2 0 1 6-8 0 5

浙江省医药卫生科技计划项目（2 0 1 6 K Y B 1 1 4）

3 1 0 0 0 9杭州，浙江大学医学院附属第二医院检验科

曹敏，E-m a i l：c a o m i n 0 6 0 7@1 6 3.c o m