miR⁃646抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移的机制初探
2017-09-03裴祎牟帅薛峰滕松龄王广斌
裴祎,牟帅,薛峰,滕松龄,王广斌
(1.中国医科大学肿瘤医院,辽宁省肿瘤医院骨与软组织肿瘤科,沈阳 110042;2.中国医科大学附属盛京医院骨科,沈阳 110004;3.沈阳医学院附属中心医院手外科,沈阳 110024)
miR⁃646抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移的机制初探
裴祎1,牟帅2,薛峰2,滕松龄3,王广斌2
(1.中国医科大学肿瘤医院,辽宁省肿瘤医院骨与软组织肿瘤科,沈阳 110042;2.中国医科大学附属盛京医院骨科,沈阳 110004;3.沈阳医学院附属中心医院手外科,沈阳 110024)
目的探讨miR-646对骨肉瘤细胞增殖和迁移的抑制作用。方法通过MTT实验检测miR-646过表达或受到抑制后对U2OS细胞增殖的影响。Transwell实验分析miR-646过表达或受到抑制后对U2OS细胞迁移的影响。MIRDB预测miR-646与表皮生长因子受体(EGFR)的位点结合后,利用荧光素酶报告及实验检测miR-646对EGFR的靶向作用,并通过Western blotting检测miR-646对EGFR通路的作用。结果MTT结果表明,转染miR-646后U2OS细胞的增殖受到了显著地抑制,24 h时抑制率为21.76%±1.05%,相反,当miR-646受到抑制后U2OS细胞的增殖得到了促进,24 h时促进的比率为18.89%±0.81%。Transwell实验发现miR-646可以抑制骨肉瘤细胞系U2OS的迁移能力。随后MIRDB预测发现miR-646与EGFR的3’UTR区域具有结合位点,荧光素酶报告基因实验证明了miR-646可以直接作用于EGFR。Western blotting结果证明miR-646对U2OS细胞增殖迁移能力的抑制在一定程度上是通过miR-646对EGFR通路的抑制实现的。结论miR-646可以通过抑制EGFR通路的活性,进而抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移功能。
miR-646;骨肉瘤;表皮生长因子;迁移;增殖
骨肉瘤是最常见的一种儿童原发性恶性肿瘤,骨肉瘤患者的5年生存率约为68%,但是一旦发生转移,其5年生存率则锐减至20%左右[1-2]。……
