王 艳，王继洋，王坤芃，彭志锋，杨 霞，王川庆

(河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002)

鸭源鸡杆菌外膜蛋白A基因克隆及结构与功能分析

王 艳，王继洋，王坤芃，彭志锋，杨 霞，王川庆*

(河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002)

为筛选鸭源鸡杆菌(G.anatis)潜在的保护性抗原基因，参考GenBank中G.anatisUMN179的外膜蛋白A(OmpA)基因序列设计1对引物，对鸭源鸡杆菌PDS-RZ-1-SLG(RZ)株的OmpA基因进行克隆，并应用相关软件对其核苷酸及氨基酸序列进行生物信息学分析。结果显示，OmpA基因大小为1 083 bp，编码360个氨基酸；鸭源鸡杆菌RZ株的OmpA与UMN179、F149及12656/12的OmpA氨基酸相似性分别为93.2%、95.2%、92.7%；OmpA蛋白分子质量为38.4 ku，等电点为6.77，具有稳定性，N端有1个疏水性的α螺旋信号肽。

鸭源鸡杆菌；OmpA基因； 克隆; 结构与功能分析

鸡杆菌属(Gallibacterium)细菌属于巴氏杆菌科，为革兰氏阴性菌，其中鸭源鸡杆菌(Gallibacteriumanatis)为其代表种[1]，且是健康禽类上呼吸道和下生殖道的一种常在菌。研究发现，该菌与蛋鸡的输卵管炎、腹膜炎、败血症、肝炎及呼吸道疾病密切相关，能够造成产蛋鸡产蛋数量和质量下降，死亡率上升，给养鸡业带来了巨大的经济损失[2-4]。由于鸭源鸡杆菌本身抗原多样性的存在[5]和当前抗生素的滥用，使得该菌多重耐药性危害逐年加重[6]，也使得疫苗的研制困难重重。鸭源鸡杆菌致病机制复杂，目前只有少数毒力因子得到确认。因此，对鸭源鸡杆菌的毒力因子进行研究，不仅有利于研究鸭源鸡杆菌致病机制，还可为其新型疫苗的研发奠定基础。

外膜蛋白(outer membrane proteins,OMPs)是镶嵌于革兰氏阴性菌细胞壁中的膜蛋白，在病原菌的致病过程中发挥重要作用，能够激发宿主的体液免疫和细胞免疫，且具有良好的免疫保护作用，因此，可将外膜蛋白作为亚单位疫苗的主要候选抗原[7]。……