李晓楠，唐青海,*，李 羽，王 瑾，姚伦广，阚云超，杨 海

(1.南阳师范学院 河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室/昆虫生物反应器河南省工程实验室，河南 南阳 473061；2.衡阳师范学院 生命科学与环境学院/生物药物研究所，湖南 衡阳 421008)

1株猪传染性胃肠炎病毒的分离鉴定及其生物学特性研究

李晓楠1，唐青海1,2*，李 羽1，王 瑾1，姚伦广1，阚云超1，杨 海2

(1.南阳师范学院 河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室/昆虫生物反应器河南省工程实验室，河南 南阳 473061；2.衡阳师范学院 生命科学与环境学院/生物药物研究所，湖南 衡阳 421008)

采集1例疑似感染猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)仔猪的粪便，运用RT-PCR方法和血清学方法对病料进行TGEV检测，并应用猪睾丸细胞(ST)进行病毒分离培养，分别采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)和RT-PCR方法检测病毒在ST细胞中的增殖动态，应用RT-PCR方法扩增分离TGEVS1基因，经序列测定后，采用DNAStar 7.0和Mega 5.0软件对TGEV进行生物信息学分析。结果表明，病料接种到ST细胞培养后，出现明显细胞病变效应(CPE)；RT-PCR检测结果显示，TGEV核酸阳性；血清学鉴定TGEV抗原阳性。将分离毒株命名为TGEV-NY。感染12 h后，IPMA检测结果阳性，且可从细胞培养上清中检出TGEV核酸。序列测定分析表明，分离毒株S1基因开放阅读框(ORF)为2 220 bp，编码740个氨基酸。进化分析显示，分离毒株与我国2006年分离的SC-Y毒株亲缘关系最近，分离毒株属于基因Ⅰ群。

猪传染性胃肠炎病毒； 分离培养； 免疫过氧化物酶单层细胞染色法；S1基因

传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus，TGEV)是冠状病毒科(Coronaviridae)成员，该病毒是引起猪胃肠炎的主要病原体。……