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白念珠菌CaCSC1基因的敲除和功能研究

2017-08-31杨益王亚楠蒋伶活

中国真菌学杂志 2017年3期

杨益 王亚楠 蒋伶活

(江南大学生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,无锡 214122)

·论著·

白念珠菌CaCSC1基因的敲除和功能研究

杨益 王亚楠 蒋伶活

(江南大学生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,无锡 214122)

目的 构建白念珠菌CaCSC1基因的基因缺失株,并初步探究它的功能。方法 设计长引物,通过PCR直接扩增出带有SAT1 flipper的CaCSC1基因敲除盒,转化到野生型白念珠菌菌株CAI4,并通过PCR鉴定出基因型正确的转化子,得到CaCSC1的基因缺失株。最后,通过倍比稀释的方法进行表型筛选。结果 成功得到CaCSC1基因的缺失菌株。基因缺失菌株对酮康唑 (Ketoconazole)敏感,对Zn2+、Mn2+和荧光增白剂 (Calcofluor white)表现出耐受性。结论 CaCsc1蛋白参与对锌离子和锰离子的稳态调控,和细胞膜和细胞壁的完整性也相关。

白念珠菌;CaCSC1基因;基因敲除;离子稳态

[Chin J Mycol,2017,12(3):144-147]

白念珠菌 (Candidaalbicans)是临床上最常见的人体条件致病真菌,存在于正常人体的皮肤黏膜,与其宿主免疫系统维持平衡的状态[1]。当机体免疫力下降时,白念珠菌引发危及生命的系统性真菌感染[2]。在长期的临床治疗中,白念珠菌逐渐对一些抗真菌药物产生耐药性,大大降低了临床治疗的效果[3-4]。因此,研究并揭示白念珠菌的致病与耐药机理,发现白念珠菌新型毒力因子,开发新型抗真菌药物,对白念珠菌感染的治疗具有重要意义。

离子通道对于细胞的生存至关重要,细胞利用离子通道进行营养吸收,同时也利用通道感知环境刺激和进行信号传导[5]。在真核生物中,许多环境刺激都能引起钙离子的跨膜流动。……

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