颜 敏， 瞿 新

湖北医药学院附属人民医院检验科，湖北 十堰 442000

羧肽酶B活性肽和磷脂酶A2在急性胰腺炎临床诊断中的价值

颜 敏， 瞿 新

湖北医药学院附属人民医院检验科，湖北 十堰 442000

目的 评估羧肽酶B活性肽(CAPAP)和磷脂酶A2(PLA2)在急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)临床诊断中的价值。方法 选取2013年7月-2015年7月因急性腹痛于湖北医药学院附属人民医院就诊的疑似AP患者148例，其中轻度急性胰腺炎(MAP)组患者52例，重度急性胰腺炎(SAP)组患者40例，非急性胰腺炎急腹症组(non-acute pancreatitis abdomen, NAP)56例，同时选取同期进行常规体检的健康人群42名作为对照组，分别采用胶体金法和ELISA法检测四组患者的尿CAPAP及血清PLA2水平，并比较血清淀粉酶(Amy)、PLA2及尿CAPAP在SAP早期诊断中的效能。结果 与对照组和NAP组相比，MAP组和SAP组患者的尿CAPAP阳性率和血清PLA2水平均显著升高，且随患者病情严重程度的加重而升高(P<0.05)；血清PLA2及尿CAPAP在SAP的诊断灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值等较血清Amy显著升高，且尿CAPAP的诊断效能明显优于血清Amy和PLA2(P<0.05)。结论 血清PLA2及尿CAPAP均可用于AP的辅助诊断，多项指标联合检测可显著提高AP的诊断灵敏度和特异度，具有较高的参考价值。

急性胰腺炎；羧肽酶B活性肽；磷脂酶A2；诊断价值

急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是临床中较为常见的一种消化系统疾病，根据其临床症状、病理特征和影像学特点可划分为轻度急性胰腺炎(mild acute pancreatitis, MAP)及重度急性胰腺炎(sever acute pancreatitis, SAP)[1]。其中MAP占70%～80%，该类患者并发症较少，预后良好，死亡率较低。SAP患者虽所占比例较小，但其病情发展迅速，并极易引发全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome, SIRS)甚至导致多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome, MODS)的发生，死亡率高达20%[2-3]。因此，AP的早期诊断对控制患者的病情及制定适宜的治疗方案至关重要。羧肽酶是由胰腺腺泡分泌的一类蛋白水解酶，无活性的羧肽酶原在消化酶的作用下分解为羧肽酶A和羧肽酶B，羧肽酶B激活肽(carboxypeptidase B activation peptide, CAPAP)在医学中经常用于AP的辅助检测和诊断[4-5]。磷脂酶A2(phospholipase A2, PLA2)是存在于哺乳动物组织及细胞内的一类蛋白酶超家族，其下游产物广泛参与能量代谢、调控基因及炎症介质表达等生物学过程[6]。研究[7]表明，在正常生理状态下，其表达量较低，当其过量表达或积聚时则预示着可能存在病理疾病的发生。本研究旨在评估羧肽酶B及PLA2在AP临床诊断中的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年7月-2015年7月因急性腹痛于湖北医药学院附属人民医院就诊的疑似AP患者148例，经临床特征、实验室相关酶学指标、影像学检查及APACHEⅢ评分[8]联合确诊的AP患者为92例，其中MAP组患者52例，男31例，女21例，年龄(54.5±9.4)岁；SAP组患者40例，男24例，女16例，年龄(53.9±10.1)岁。非急性胰腺炎急腹症(NAP)组56例，男32例，女24例，年龄(55.1±9.0)岁。同时选取同期来我院进行常规体检的健康人群42名作为对照组，男26名，女16名，年龄(54.7±8.4)岁。经统计，四组患者的年龄与性别构成组间比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性(见表1)。

1.2 方法 所有患者行入院检查, 1～3 h内抽取静脉血3 ml，抗凝处理后，4 000 r/min,离心10 min，留取上清以检测血清淀粉酶(Amy)、脂肪酶(Lip)及脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平。同时留取尿液进行CAPAP水平检测。其中Amy的参考值为25～125 U/L，Lip的参考值为24～300 U/L，血清Lp-PLA2的参考值为4.53～10.25 μg/L。尿CAPAP的检测结果分为阴性和阳性。

1.3 仪器与试剂 采用α-淀粉酶测定试剂盒(EPS法，中生北控生物科技有限公司)检测患者血清Amy水平；采用Lip检测试剂盒(酶比色法，宁波生物科技有限公司)检测患者血清Lip水平；采用sPLA2 ELISA检测试剂盒(艾美捷科技有限公司)检测患者血清PLA2水平；采用羧肽酶B检测试剂盒(胶体金法，北京科泰生物工程有限公司)检测患者尿液中羧肽酶B水平。iMark酶标仪购自美国Bio-Rad公司。

2 结果

2.1 一般资料 与对照组相比，NAP组和AP组患者血清Amy水平均显著升高，且SAP组患者水平明显高于MAP组(P<0.05)；对照组和NAP组患者血清Lip水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，MAP组和SAP组较对照组均显著升高(P<0.05)，但两组组间血清Lip水平比较，差异无统计学意义(P>0.05，见表1)。

表1 四组患者一般资料比较

Tab 1 Comparison of the general data among four groups

组别例数年龄(x±s,岁)性别(男/女)血清Amy(x±s,U/L)血清Lip(x±s,U/L)对照组4254.7±8.426/1693.4±30.5123.6±42.7NAP组5655.1±9.032/24195.8±42.3a167.1±57.7MAP组5254.5±9.431/21518.4±282.9ab1491.7±1147.6abSAP组4053.9±10.124/16761.5±417.7abc1718.3±1034.2ab

注：与对照组相比，aP<0.05；与NAP组相比，bP<0.05；与MAP组相比，cP<0.05。

2.2 四组患者血清PLA2及尿CAPAP水平比较 对照组和NAP组患者的尿CAPAP阳性率及血清PLA2差异无统计学意义(P>0.05)，而MAP组和SAP组患者的CAPAP阳性率和血清PLA2均显著高于对照组，且该两项指标均随患者病情严重程度的增加而显著升高(P<0.05，见表2)。

2.3 血清Amy、PLA2及尿CAPAP对SAP的诊断效能评价 通过对血清Amy、PLA2及尿CAPAP在SAP患者中的诊断效能进行比较，血清PLA2和尿CAPAP对SAP的单项诊断中，其灵敏度、准确度及阴性预测值均显著高于血清Amy对SAP的诊断(P<0.05)，且尿CAPAP诊断SAP的特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值也明显高于血清Amy和PLA2，差异有统计学意义(P<0.05，见表3)。

表2 四组患者尿CAPAP阳性率及血清PLA2水平比较

Tab 2 Comparison of CAPAP positive rate and serum PLA2 level of patients among four groups

组别例数尿CAPAP阳性率[n(%)]血清PLA2(x±s,μg/L)对照组420(0)6.6±2.1NAP组562(3.6)6.9±2.3MAP组5218(34.6)ab17.4±5.8abSAP组4032(80.0)abc26.1±7.0abc

注：与对照组相比，aP<0.05；与NAP组相比，bP<0.05；与MAP组相比，cP<0.05。

表3 血清Amy、PLA2及尿CAPAP对SAP的诊断效能(%)

Tab 3 Diagnostic efficacy of serum Amy, PLA2 and urine CAPAP in SAP(%)

指标灵敏度特异度准确度阳性预测值阴性预测值血清Amy73.164.370.079.256.3血清PLA284.6a64.377.5a81.569.2a尿CAPAP88.9a76.9ab85.0ab88.9ab76.9ab

注：与血清Amy相比，aP<0.05；与血清PLA2相比，bP<0.05。

3 讨论

AP是一种常见的消化系统疾病，具有发病快、进展迅速、并发症严重、病死率高的特点，因此早期诊断AP可为其后续的临床治疗奠定重要的基础。目前，临床中主要通过检测患者的血清Amy、尿液Amy、Lip及尿肌酐等指标来诊断AP的发生[9]。Amy的检测虽简便易行，但易受生理及环境等多因素的影响，导致检测结果的波动起伏[10]。Lip的诊断特异性虽高于Amy，但无法反映疾病的严重程度[11]。因此，寻找灵敏度及特异性较高的实验室辅助检测指标，对AP的早期诊断及后续治疗具有重要价值。

CAPAP是由胰腺腺泡分泌的一种蛋白水解酶，在正常生理状态下以无活性的酶原形式存在，不被肠道所吸收，在血液中也不与其他物质反应，因而在血清和尿液中的含量较为稳定。当有AP发生时，胰腺组织受损，腺泡被破坏，导致大量CAPAP的分泌与释放，使得血清及尿液中的含量显著上升，因此，检测CAPAP的浓度有助于判断早期AP的发生并评估病情的严重程度[12-13]。PLA2可通过催化水解磷脂Sn-2位酯键生成游离脂肪酸及溶血酸酯，是控制脂介质的核心酶，主要分为分泌型(PLA2-Ⅰ和PLA2-Ⅱ)、胞浆型(PLA2-Ⅲ和PLA2-Ⅳ)及非钙离子依赖型(iPLA2)3类，在抗炎、抗凝、动脉硬化、抗感染和肿瘤等方面起重要作用[14-15]。近年来炎症因子的过度合成及释放被认为在AP的发生、发展中发挥重要作用，已有研究[16-17]证明，PLA2-Ⅱ和PLA2-Ⅳ在胰腺损伤及其他炎症反应过程中显著升高，因此，PLA2的测定对急性坏死性胰腺炎及多器官功能衰竭具有重要的参考价值。本研究通过检测AP患者体内CAPAP及PLA2的水平，评估这两项指标在AP临床诊断中的价值。

本文研究结果发现，与对照组和NAP组患者相比，MAP和SAP组患者的尿CAPAP检出阳性率和血清PLA2水平均显著升高，且SAP组患者尿CAPAP检出阳性率和血清PLA2水平显著高于MAP组患者，说明随着AP病情的加剧，尿CAPAP的检出阳性率及血清PLA2水平也随之增加。表明CAPAP的浓度和血清PLA2水平可较为灵敏地反映胰腺的受损情况及胰腺组织受创后炎症及感染等发生情况。即巨噬细胞、单核细胞及中性粒细胞激活后释放大量的PLA2于体液中，由此产生的脂质介质在炎症反应和组织损伤过程中的膜通道活化、信息传递等病理过程中起到关键作用，可作为AP诊断的早期信号参数之一[18-19]。CAPAP经肾小球滤过后在人的尿液中存在较为稳定，当尿液中CAPAP的浓度大幅度上升时，则可能是AP患者的胰腺被破坏，导致细胞内的酶大量释放到体液中，因此通过检测尿液中CAPAP的浓度即可较为灵敏地评估AP的发生及其严重程度，较好地弥补了血清Amy等指标在评估AP患者病情上的不足。

此外，通过对血清Amy、PLA2及尿CAPAP在SAP早期诊断效能的评价比较发现，血清PLA2及尿CAPAP在诊断SAP的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值等较血清Amy显著升高，尤以尿CAPAP的诊断高度灵敏性和特异性最为突出，这表明血清PLA2及尿CAPA在SAP的诊断及严重程度评估上具有极大的参考价值，这与国内外的相关研究[20-22]一致。相反，传统实验室指标如血清Amy，其诊断特异性及灵敏度则较低，无法高效地区分AP的严重程度。

综上所述，血清PLA2及尿CAPAP在AP的诊断中操作简单、廉价、灵敏度高、特异性强，并可较好地预测病情的严重程度，对AP的诊断具有重要的参考价值。

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(责任编辑：李 健)

The clinical diagnostic value of CAPAP and PLA2 in acute pancreatitis

YAN Min, QU Xin

Department of Clinical Laboratory, the People’s Hospital Affiliated to Hubei Medical College, Shiyan 442000, China

Objective To evaluate the clinical diagnostic value of carboxypeptidase B activation peptide (CAPAP) and phospholipase A2 (PLA2) in acute pancreatitis (AP). Methods One hundred and forty-eight patients with suspected AP from Jul. 2013 to Jul. 2015 in the People’s Hospital Affiliated to Hubei Medical College were selected as the MAP group, SAP group and NAP group, and 42 cases of healthy people were selected as the control group. The urine CAPAP and serum PLA2 levels were detected by colloidal gold and ELISA method, respectively. And the diagnostic efficacy of serum Amy, PLA2 and urine CAPAP in SAP were compared. Results Compared with control group and NAP group, the urine CAPAP positive rate and serum PLA2 level in MAP group and SAP group were not only significantly increased, but also increased with the aggravation of the AP patients (P<0.05). Besides, the diagnostic efficacy of serum Amy, PLA2 and urine CAPAP in SAP showed that the sensitivity, specificity, accuracy, positive predictive value and negative predictive value of serum PLA2 and urine CAPAP in SAP were significantly increased, and especially the urine CAPAP (P<0.05). Conclusion The serum PLA2 and urine CAPAP can be applied to AP diagnosis, the diagnostic sensitivity and specificity of AP can be highly increased by multiple indicators detection, and it has an important reference value to the treatment of AP.

Acute pancreatitis; CAPAP; PLA2; Diagnostic value

10.3969/j.issn.1006-5709.2017.07.007

颜敏，副主任技师， 研究方向：胰腺检验。E-mail: huihulay@163.com

瞿新，副主任技师，研究方向：免疫和分子生物检验。E-mail: 351477594@qq.com

R576

A

1006-5709(2017)07-0744-04

2017-02-19