邱会，胡敏，钟敏钰

（1.湖北省武汉市第一医院 肿瘤科，湖北 武汉 430022；2.华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院 血管外科，湖北 武汉 430000）

基础研究·论著

miR-30a-5p对肺癌细胞增殖与迁移的影响及其机制*

邱会1，胡敏2，钟敏钰1

（1.湖北省武汉市第一医院 肿瘤科，湖北 武汉 430022；2.华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院 血管外科，湖北 武汉 430000）

目的研究miR-30a-5p对非小细胞肺癌（NSCLC）增殖和迁移的影响，并探讨其调控机制。方法NSCLC A549细胞系分成两组，miR-30a-5p组和对照组，分别转染miR-30a-5p mimics和microRNA scramble，MTT实验及细胞划痕实验分别测定两组细胞增殖和迁移能力，实时聚合酶链反应（real time-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别测定两组泛素蛋白连接酶（UBE3C）mRNA和蛋白质表达水平。结果培养48 h后，miR-30a-5p组相对活细胞百分比低于对照组（[203.7±16.8）%vs（330.4±20.7）%（P=0.000）]；培养72 h后，miR-30a-5p组相对活细胞百分比（258±30.2）%，对照组相对活细胞百分比（403.4±28.4）%，miR-30a-5p组相对活细胞百分比低于对照组（P=0.001）。细胞划痕实验示：miR-30a-5p组划痕愈合率为（23.2±2.7）%，对照组划痕愈合率为（89.2±4.8）%，miR-30a-5p组划痕愈合率低于对照组（P=0.000）。real time-PCR显示，miR-30a-5p组 UBE3C mRNA表达水平为（0.15±0.02），对照组UBE3C mRNA表达水平为（1.03±0.09），miR-30a-5p组UBE3C mRNA表达水平低于对照组（P=0.000）；Western blot显示，miR-30a-5p组UBE3C蛋白表达水平为（1.57±0.26），对照组UBE3C蛋白表达水平为（5.32±0.42），miR-30a-5p组UBE3C蛋白表达水平低于对照组（P=0.000）。结论miR-30a-5p抑制NSCLC增殖和迁移，其机制与下调UBE3C表达有关。

miR-30a-5p；非小细胞肺癌；增殖；迁移

Abstract:ObjectiveTo investigate the role of miR-30a-5p on the regulation of the proliferation and migration of NSCLC,and its regulatory mechanism.MethodsA549 cells were divided into two groups,miR-30a-5p group(transfected with miR-30a-5p mimics)and control group(transfected with microRNA scrambles).The proliferation and migration ability was measured by MTT assay and wound healing experiment,respectively.The expression level of UBE3C mRNA and protein was measured by RT-PCR and Western blot.ResultsThe relative percentage of living cells in miR-30a-5p group was significantly lower than control group after culturing for 48 h,(203.7±16.8)%vs(330.4±20.7)%,P=0.000.There was(258±30.2)%of relative percentage of living cells in miR-30a-5p group,which was significantly lower than(403.4±28.4)%in the control group(P=0.001).The wound healing rate was (23.2±2.7%)in miR-30a-5p group,which was significantly lower than(89.2±4.8)%in the control group (P=0.000).RT-PCR indicated that the expression level of UBE3C mRNAwas(0.15±0.02)in miR-30a-5p group,which was significantly lower than(1.03±0.09)in the control group(P=0.000).The expression level of UBE3C protein was(1.57±0.26)in miR-30a-5p group,which was significantly lower than(5.32± 0.42)in control group(P=0.000).ConclusionsMiR-30a-5p inhibits cell proliferation and migration of non-small cell lung cancer cell by suppressing UBE3C gene expression.

Keywords:miR-30a-5p;non-small cell lung cancer;proliferation;migration

非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）是肺癌的主要类型，恶性程度高[1-2]。目前，虽然得益于手术、放化疗的进度，NSCLC治疗效果有所进步，但其5年生存率仍不到15%[2]，肿瘤恶性增殖和迁移仍是影响预后的重要原因[3]。深入探讨NSCLC增殖和迁移的机制对设计新的治疗药物具有重要的意义。……