人参皂苷酶Ⅲ型转化人参皂苷Rc制备稀有皂苷C-Mc
2017-08-07李冠亨,刘春莹,徐龙权,林完泽,鱼红闪
李 冠 亨, 刘 春 莹, 徐 龙 权, 林 完 泽, 鱼 红 闪
( 1.大连工业大学 生物工程学院, 辽宁 大连 116034;2.韩京国立大学 生命科学学院, 京畿道 安城 456-749 )
人参皂苷酶Ⅲ型转化人参皂苷Rc制备稀有皂苷C-Mc
李 冠 亨1, 刘 春 莹1, 徐 龙 权1, 林 完 泽2, 鱼 红 闪1
( 1.大连工业大学 生物工程学院, 辽宁 大连 116034;2.韩京国立大学 生命科学学院, 京畿道 安城 456-749 )
利用基因构建克隆的E.coliC41菌产人参皂苷酶Ⅲ型,研究了酶转化人参皂苷Rc制备高活性稀有皂苷C-Mc的方法。结果发现,人参皂苷酶Ⅲ型先水解人参皂苷Rc的3-O-末端葡萄糖基生成C-Mc1,再水解C-Mc1的3-O-葡萄糖基生成C-Mc。人参皂苷酶Ⅲ型水解4.8 g的人参皂苷Rc,得到2.8 g 产物,经HPLC检测,其纯度为90%。经核磁共振检测,产物结构为20-O-α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖基-20(S)-二醇苷元,即C-Mc。
稀有人参皂苷;人参皂苷酶Ⅲ型;高效液相色谱;核磁共振
0 引 言
生晒参和西洋参中80%~90%的皂苷为Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1,这些人参皂苷在人体内吸收率低、活性低[1-3];而人参稀有皂苷C-K、Rh2、C-Mc等更容易被吸收,具有抗疲劳、抗癌等生理功能[4-6]。但是,生晒参中几乎不含人参稀有皂苷。因此,将人参中含量高的皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1生物转化制备成高活性的C-K、Rh2、C-Mc等人参稀有皂苷,对人参产业、新药开发、保健食品和化妆品等具有重大意义[7-8]。
人参皂苷的转化方法主要有化学法和酶法,这两种方法都能使人参皂苷转化成高活性的稀有皂苷。通过化学法转化的人参皂苷具有目的性差、产物庞杂、污染严重、难于下游分离纯化等劣势。酶法水解人参皂苷具有很多的优点,反应条件温和,在常温下即可反应,反应过程容易控制;……
