于一云 付思思 刘 磊 杨 洁 韩 磊 吕 玲

(复旦大学附属华山医院风湿科,上海200040)

瘦素通过NLRP3炎性体对小鼠骨髓树突状细胞的作用及机制①

于一云 付思思②刘 磊 杨 洁 韩 磊③吕 玲

(复旦大学附属华山医院风湿科,上海200040)

目的：探讨瘦素通过NLRP3炎性体对树突状细胞的作用及其机制。方法：体外诱导小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDCs)，用不同浓度瘦素与BMDCs共同培养，分别检测培养上清IL-1β和IL-18的蛋白和基因水平，用FLICA试剂盒或ROS试剂盒分别在流式细胞仪上检测caspase-1活性或胞内ROS生成情况。瘦素与BMDCs共培养，加入caspase-1抑制剂或用siRNA干扰NLRP3基因表达，检测前后加入IL-1β和IL-18基因和蛋白表达水平。瘦素与BMDCs共培养，加入ROS抑制剂或KCL，检测加入前后IL-1β和IL-18蛋白分泌水平。结果：瘦素促进BMDCs分泌IL-1β和IL-18。瘦素通过上调NLRP3基因促进IL-1β和IL-18基因和蛋白表达，通过激活caspase-1蛋白提高IL-1β基因和蛋白水平，K+外流参与此过程。 结论：瘦素通过激活NLRP3炎性体促进BMDCs IL-1β和IL-18基因和蛋白表达，此过程部分通过K+外流实现。这提示瘦素可能是NLRP3炎性体的激活剂。

瘦素；NLRP3炎性体；树突状细胞；细胞因子

NLRP3，又名 NLAP3，与衔接蛋白 ASC 和效应蛋白 caspase-1 共同构成NLRP3 炎性体。NLRP3 炎性体是目前发现的配体最多的炎性体，可以被外源性病原微生物及内源性晶体、尿酸、dsDNA、ATP 等激活[1,2]，各种配体主要通过3种方式激活 NLRP3 炎性体:细胞内 K+外流、ROS的产生和溶酶体破裂[2,3]。NLRP3 炎性体激活最终导致caspase-1 的活化从而促进炎症细胞因子 IL-1β、IL-18 的分泌而调节免疫应答和炎症反应[4]。NLRP3 主要在包括单核-巨噬细胞、树突状细胞(DC)等髓系细胞中表达，但是最近多篇研究报道Th1、Th2、Th17均可表达NLRP3[5-7]。……