冯育芳，王莎莎，邢 进，付 瑞，巩 薇，岳秉飞

(中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所，北京 100050)

实验树鼩空肠弯曲菌、沙门氏菌和志贺菌多重荧光定量PCR方法的建立

冯育芳，王莎莎，邢 进，付 瑞，巩 薇，岳秉飞

(中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所，北京 100050)

目的 为实验树鼩微生物检测提供一种快速、简便、灵敏，并且特异性强的空肠弯曲菌、沙门氏菌和志贺菌多重荧光定量PCR检测方法。方法 根据空肠弯曲菌的HipO区域、沙门菌的inV区域和志贺菌的ipaH区域设计特异性引物和探针，并进行单病原定量PCR检测验证；后分析多重PCR的灵敏度和特异性，并使用该多重PCR方法检测实验树鼩样品。结果 本研究的PCR要素可用于空肠弯曲菌、沙门氏菌及志贺菌等单种菌的实时荧光定量PCR扩增。多重定量PCR扩增出了空肠弯曲菌、沙门氏菌和志贺氏菌标准扩增曲线；该方法的灵敏度为1×103ng/μL；特异性检测未从其他参考菌株中检出阳性。结论 该多重定量PCR方法在实验树鼩微生物检测中具有很好的应用和推广前景。

实验树鼩；空肠弯曲菌；沙门氏菌；志贺菌；多重定量PCR；

空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)，是弯曲杆菌属的一种，是近十年来受到国内外广泛重视的人畜共患病原菌[1]。沙门氏菌(Salmonella)也是一种在公共卫生学上具有重要意义的，常见的人畜共患病的病原菌，广泛分布于自然界[2]。志贺氏菌(Shigella)是人类细菌性痢疾的病原体，主要引起急性直肠结肠炎和痢疾[3]。空弯、沙门和志贺均属于肠道病原菌，对人和动物都可以致病，引起的症状也很类似，三种菌都可引起急性肠炎和食物中毒症状[4]，为实验动物需要排除的病原体。……