杜朝阳，杨如玉，李 超，段丽娟

(河南省南阳市中心医院血液科，河南 473001)

miR-214通过靶向调控E2F3抑制肝癌细胞的增殖

杜朝阳，杨如玉，李 超，段丽娟

(河南省南阳市中心医院血液科，河南 473001)

目的 探讨miR-214通过靶向调控E2F转录因子3(E2F3)抑制肝癌细胞的增殖。方法 RT-PCR法检测细胞株SMMC-7721、HepG2、SK-Hep-1和Huh 7中miR-214的表达量，并利用脂质体转染miR-214 NC及miR-214 mimics。采用MTT法检测miR-214对肝癌细胞活力的影响；Hoechst染色试剂盒检测miR-214对细胞凋亡的影响，流式细胞术检测miR-214对细胞周期的影响；Western blot及RT-PCR法检测miR-214对肝癌细胞中E2F3蛋白及mRNA表达量的影响，并通过荧光素酶报告基因进行验证。结果 SMMC-7721、SK-Hep-1、Huh 7及HepG2中miR-214的表达量分别为(0.83±0.08)、(0.32±0.03)、(0.33±0.03)、(0.08±0.01)，其中HepG2中miR-214表达量最低，因此选用HepG2作为后续实验细胞株。HepG2细胞转染miR-214 NC及miR-214 mimics、miR-214 mimics组中miR-214表达量(0.65±0.06)明显高于miR-214 NC组(0.14±0.01)，miR-214 mimics组细胞活力(0.35±0.03)明显低于miR-214 NC组(0.69±0.06)，miR-214 mimics组细胞凋亡率(36.37±3.43)%明显高于miR-214 NC组(3.74±0.34)%，miR-214 mimics组G1期明(57.79±5.78)显长于miR-214 NC组(45.319±4.53)，miR-214 mimics组中E2F3蛋白[(0.23±0.02)、(0.24±0.02)]及mRNA表达量明显低于miR-214 NC组[(0.98±0.09)、(0.99±0.10)]，差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 miR-214过表达能通过下调E2F3表达抑制肝癌细胞的增殖。

miR-214，肝癌细胞；E2F3；增殖

原发性肝癌是肝细胞或肝内管细胞发生的恶性肿瘤，其中90%为肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)，是位居世界第五位及致死率第3位的肿瘤[1, 2]。目前，手术切除和肝移植是HCC最为有效的治疗方法，然而，临床研究表明超过50%的接受肝切除术的HCC患者出现术后复发[1, 2]。因此，探讨肝癌的发生发展的相关机制，对于肝癌的诊断，治疗及预后具有重要的意义。

MicroRNA(miRNA)是一类非编码小分子RNA，能够结合于靶基因mRNA的3’-UTR区域，降解或者阻遏靶基因的翻译，从而抑制靶基因的表达。近些年大量研究证实miRNA在肿瘤的发生发展中起着重要的作用，包括肝癌[3]。miRNA微阵列研究显示，miR-214在肝癌组织中的表达明显低于正常肝组织[4]。……