马忠平 黄健 张志峰 杨云 叶楠

内蒙古医科大学第二附属医院关节外科，内蒙古 呼和浩特 010030

骨质疏松症作为临床上最为常见的骨代谢异常状态，以骨密度下降为主要特点，常常增加患者的骨折风险[1]。国外研究提示，高血压病和骨质疏松症存在着密切的联系，绝经期后妇女骨量丢失明显加速，骨形成明显不足，而老年高血压病患者体内持续的高血压状态引起血管硬化损伤，加速骨量流失[2]。贝尼地平是临床上常用的L型钙离子通道阻滞剂，在降低血压的同时对成骨细胞有明显的促进成骨作用[3]，但该药物对骨代谢作用至今仍未见报道。

1 材料和方法

1.1 材料

雌性10周大C57/BL6小鼠，体重20～23 g，购至内蒙古农业大学实验动物中心；主要实验仪器与试剂：(1)主要仪器：倒置光学显微镜(Nikon，TE2000-U)，荧光显微镜(Olympus，FV-1000)，显微CT(SCANCO Medical，μCT80)，石蜡切片机(Leica公司)。(2)主要试剂：一抗Runx2(CST公司)，一抗OCN(CST公司)，偶联异硫氰酸荧光素山羊抗兔二抗(Abcam公司)，伊红(Sigma公司)，苏木素(Sigma公司)，乙二胺四乙酸(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid，EDTA，Sigma公司)，甘油(Sigma公司)。

1.2 动物饲养与造模

随机将30只10周大C57/BL6小鼠平分为3组，分别为：假手术组(Sham)10只，去卵巢组(OVX)10只，去卵巢加药组(OVX+BD)10只；假手术组切除卵巢周围少量脂肪垫后缝合，去卵巢组完整切除双侧卵巢，去卵巢加药组在完整切除双侧卵巢后灌胃贝尼地平20 mg/(kg·d)。所有小鼠正常饮食，常规饲养3个月后，断颈处死，取股骨4 ℃下4%多聚甲醛固定24小时，EFTA-甘油溶液4 ℃脱钙1个月。

1.3 组织学检测

股骨石蜡包埋，切片(厚度5 μm)，行伊红苏木素染色，倒置光学显微镜观察股骨下段骨小梁数量，拍照，Image-Pro Plus(version 6.0，IPP，美国)软件测量骨小梁作色区域面积定量。……