柳辰玥 赵保胜 刘海霞 朱如愿 王丽丽 马如风 李琳 陈贝贝 顾小盼 潘勃 吴臻 张东伟

1.北京中医药大学中药学院，北京 100102 2.北京中医药大学北京中医药研究院，北京 100029 3.北京中医药大学基础医学院，北京 100029 4.北京中医药大学糖尿病研究中心，北京 100029

骨质疏松是一种以骨量降低、骨微结构破坏为特征，并致骨脆性增加，易于发生骨折的慢性代谢性骨骼疾病[1]，受遗传和环境因素共同影响[2]。研究发现，ApoE-/-小鼠给予高脂饲料饲养一段时间后，骨形成减少和骨吸收增加，骨吸收和骨形成动态平衡被打破[3]，骨量明显减少[4-7]，造成骨质疏松。

临床研究也发现，服用磺脲类降糖药的患者骨折发生率降低[8]，但关于磺脲类降糖药对高脂饮食患者骨重建的影响及其作用机理，目前尚无详细报道。因此，本实验以高脂饮食造成ApoE-/-小鼠骨质疏松为对象，探索格列美脲对其骨微结构和骨生物力学的影响及可能的作用机理。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1主要仪器：Olympus BX53 倒置荧光显微镜，日本Olympus公司。RM2255 Leica轮转式切片机，德国Leica公司。博勒飞质构仪CT3，美国Brookfield公司。

1.1.2药品与试剂：格列美脲片，赛诺菲(北京)制药有限公司，批号：4JB061。乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)，北京市化学试剂公司。Fast Green，美国Sigma公司。Safrain O，美国Sigma公司。骨组织抗原修复液，上海舜百生物科技有限公司。免疫组化试剂盒，北京中杉金桥生物公司，批号：K152411A。DAB显色试剂盒，北京中杉金桥生物公司，批号：K166913B。Cathepsin K(ab19027)，Abcam公司。

1.1.3实验动物：SPF级C57BL/6和ApoE-/-小鼠，体重18～20 g，购自于北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2012-0001，并饲养于北京中医药大学科研实验中心清洁级动物实验室，合格证号：SCXK(京)2011-0024，室温22 ℃，相对湿度55%，光暗周期12 h/12 h，自由饮水、饮食，适应性饲养7 d后开始实验。……