林海鸣 黄云梅 吴银生 黄美雅 陈翔 刘振涛 林燕萍

福建中医药大学，福建 福州 350122

绝经后骨质疏松(PMOP)发病的主要原因是由于绝经后妇女卵巢功能下降，特别是雌激素的缺乏，导致骨吸收作用增强，造成快速骨丢失所引起。PMOP的发生与骨代谢失衡密切相关，目前研究表明OPG/RANKL/RANK轴是影响骨代谢的重要途径，许多研究工作基于该轴从骨代谢入手对PMOP的发生机制进行探讨，但目前对OPG/RANKL/RANK轴与骨代谢关系的研究尚未完全阐明[1]，有待更深入的研究。课题组在既往工作中已对去卵巢大鼠骨代谢标志物的变化进行了实验研究[2]，并基于OPG/RANK/RANKL轴做了对成骨细胞OPG、RANKLmRNA表达的探讨[3]。由于PMOP是一进展性疾病，有必要在实验中进行动态观测，目前基于该轴动态检测相关蛋白表达与骨代谢指标关系的研究较少见报道，因此本研究拟对不同时期RANKL、OPG蛋白表达的变化及与BTMs(骨转换标志物)的相关性做一初步的探讨。

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1实验动物：3月龄雌性SD大鼠48只，SPF级，体重(267±21)g，购自上海斯莱克实验动物有限公司，动物许可证号：SCXK(沪)2012-0002，合格证编号：2015000517533。在福建中医药大学动物实验中心鼠类实验室饲养，医学实验动物环境设施为SPF级(合格证号：SYXK (闽)2014-0005)。

1.1.2主要试剂：兔抗大鼠RANKL一抗(武汉博士德公司)，兔抗大鼠OPG一抗(SAB公司)、辣根过氧化物酶标记山羊抗鼠、兔IgG(Earthox LLC公司)，一、二抗稀释液(碧云天生物技术研究所)，ECL发光试剂(Thermo Scientific公司)，SDS-PAGE凝胶配置试剂盒(碧云天生物技术研究所)，RIPA裂解液(南京诺唯赞公司)，BGP、CTX-I、BALP和TRAP-5b Elisa试剂盒(上海西唐公司)，PVDF膜(Invitrogen公司)。……