李晨光，赵 虹，季 红

(1.延边大学临床医学2013级，吉林 延吉130000；2.吉林大学中日联谊医院，吉林 长春130033)

*通讯作者

万古霉素骨水泥缓释药物观察及检测方法建立

李晨光1，赵 虹2*，季 红2

(1.延边大学临床医学2013级，吉林 延吉130000；2.吉林大学中日联谊医院，吉林 长春130033)

万古霉素(vancomycin)为糖肽类抗生素，临床上用于严重革兰氏阳性菌、耐甲氧西林的金葡菌(MRSA)、耐甲氧西林的表皮葡萄球菌(MRSE)所致的感染。1970年，Buchholz等发现抗生素掺入骨水泥中可以形成抗生素缓释系统，并通过浓度梯度向周围长时间持续释放。万古霉素骨水泥在临床人工关节置换等术式的局部抗感染 及其应用的实验研究中倍受关注，本文建立了高效液相色谱法检测骨水泥缓释液中的万古霉素浓度，并对缓释浓度梯度变化进行观察。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

高效液相色谱仪(Waters，515泵，UV-7500紫外检测器，655A-52柱温箱，7725手动进样器，Upper色谱工作站。)Shimadzu AEL-40SM精密分析天平，LG16-W(京立)离心机。万古霉素标准品(中国药品生物制品检定所)，甲醇、乙腈(色谱纯，天津四友)，正己烷、磷酸二氢钾、氯化钠、碳酸氢钾、氯化钾、磷酸氢二钾、氯化镁、盐酸、氯化钙、硫酸钠、Tris(分析纯，天津化学试剂)。

1.2 方法

1.2.1 色谱条件 Agilent ZORBAX SB-C18(4.6×250 mm,5 μm),Agilent ZORBAX XDB保护柱(4×4 mm,5 μm)；流动相 甲醇：乙腈：0.05 M KH2PO4(8∶1∶91)，流速1.0 ml/min，检测波长236 nm，进样量20 μl。

1.2.2 溶液的制备 模拟体液的配制：NaCl 7.996 g,NaHCO30.350 g,KCl 0.224 g,K2HPO4.3H2O 0.228 g,MgCl2。6H2O 0.315 g,1 mol/L HCl 40 ml(pH7.4),CaCl20.278 g,Na2SO40.071g,(CH2OH)3CNH2(Tris pH7.4) 6.057 g 定容于1 000 ml蒸馏水中。标准储备液(1.1 g/L)：精密称取11 mg万古霉素标准品，定容于10 ml容量瓶中，4℃保存。100 μg/ml标准溶液配制：取0.1 ml(1.1 g/L)标准储备液加入1 ml模拟体液中，混匀。10 μg/ml标准液配制：取0.1 ml(100 μg/ml)标准液加入0.9 ml模拟体液中，混匀。流动相配制：精密称取磷酸二氢钾(KH2PO4)3.4 g定容至500 ml蒸馏水中，用磷酸调PH为3.2，配制成0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液。……