周玥华，刘 星，张艳军，汪 辛，陈渝萍*

(1.西南交通大学材料先进技术教育部重点实验室，成都 610031； 2.西南交通大学材料科学与工程学院，成都 610031)

改良的两步复合酶消化法制备大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞

周玥华1,2，刘 星1,2，张艳军1,2，汪 辛1,2，陈渝萍1,2*

(1.西南交通大学材料先进技术教育部重点实验室，成都 610031； 2.西南交通大学材料科学与工程学院，成都 610031)

目的 本文报道一种基于复合酶消化法进行改良的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的分离方法。方法 采用胶原酶、胰肽酶复合酶对胸主动脉进行初步消化去除内外膜、再对中膜进行二次消化释放血管平滑肌细胞。结果 细胞分离后贴壁生长，多具梭形形态，呈现典型的“峰-谷”生长状态，1周可进行传代；多种收缩型血管平滑肌细胞的分子标记基因均在所分离培养的细胞中高表达；超过95%的细胞为alpha smooth muscle actin(α-SMA)和myosin-II显著阳性。结论 本分离方法简捷易行、重复性好，所得细胞活性佳、纯度高，可确保短时间内获得大量收缩型血管平滑肌细胞。

血管平滑肌细胞；复合酶；两步消化法

血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)参与了高血压、动脉粥样硬化和血管再狭窄等疾病的发生发展[1-4]，关于VSMC的研究是心血管疾病细胞分子病理学的重要内容，而其开展的前提是获得结构功能良好的VSMC。

目前VSMC 体外分离培养方法大致分为组织块贴壁法、酶消化法两大类。前者使用器械剥离内外膜、并将血管剪成小块进行贴壁培养，最后VSMC从组织块爬出[5-9]。该方法费用低廉，是目前国内较为通用的VSMC分离方法。……