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[摘要] 目的 探讨1，25-二羟维生素D3[1，25（OH）2D3]对人白血病6T-CEM细胞株凋亡及维生素D受体（VDR）蛋白表达的影响。 方法 培养6T-CEM细胞株，采用随机数字表法将其分为A、B、C、D四组，A、B、C组分别加入浓度为10-6、10-7、10-8 mol/L的1，25（OH）2D3，D组加入DMSO。采用MTT法检测各组吸光度A值和细胞增殖抑制率情况，AO-EB荧光染色观察各组细胞形态，流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况，RT-PCR和Western blot法检测VDR mRNA和蛋白表达。 结果 A组吸光度A值明显低于B、C组和D组（P < 0.05）；A、B、C三组的细胞增殖抑制率从高到低依次排序为A>B>C；D组CEM细胞凋亡指数明显低于A、B、C组（P < 0.05）；A组凋亡指数明显高于其他三组（P < 0.05）；各组VDR mRNA表达差异无统计学意义（P > 0.05）；A组VDR蛋白表达明显高于其他三组（P < 0.05）。 结论 1，25（OH）2D3能有效抑制6T-CEM细胞增殖，诱导其凋亡，上调VDR蛋白表达。

[关键词] 白血病；6T-CEM细胞株；1，25-二羟维生素D3；维生素D受体

[中图分类号] R733.7 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）06（c）-0012-04

[Abstract] Objective To investigate the effect of 1， 25-dihydroxyvitamin D3 [1， 25 （OH）2D3] on apoptosis of 6T-CEM cell lines and expression of vitamin D receptor （VDR） protein human leukemia. Methods The 6T-CEM cell lines were cultured and randomly divided into group A， B， C， D. Group A， B， C were added with 1， 25 （OH）2D3 with the concentration of 10-6， 10-7， 10-8 mol/L respectively， and group D was added with DMSO. The absorbance A value and cell proliferation inhibition rate were detected by MTT method， the cell morphology was observed by AO-EB fluorescence staining， and the cell apoptosis was detected by flow cytometer， the expression of VDR mRNA and protein were detected by RT-PCR and Western blot method. Results The absorbance of group A was apparently lower than that of group B， C and D （P < 0.05）； the inhibitory rate of cell proliferation of group A， B， C was A>B>C； the CEM cell apoptosis index of group D was apparently lower than that of group A， B and C （P < 0.05）； the apoptosis index of group A was apparently higher than other three groups （P < 0.05）； there was no statistically significant difference in VDR mRNA expression among the four groups （P > 0.05）. The VDR protein expression of group A was apparently higher than that of other three groups （P < 0.05）. Conclusion 1， 25 （OH）2D3 can effectively inhibit the proliferation of 6T-CEM cells， induce its apoptosis， up-regulate the VDR protein expression.

[Key words] Leukemia； 6T-CEM cell lines； 1， 25-dihydroxyvitamin D3； Vitamin D receptor

白血病是一種恶性的造血干细胞克隆性疾病，也是目前最为常见和最具威胁的血液系统疾病[1-2]。该病的发病机制较为复杂，一般认为与多个基因的调控异常有关[3]。目前临床上多采用基因靶向药物治疗慢性粒细胞白血病，虽然取得了一定的效果，但其分子靶点具有一定的局限性，对一些急变期慢性粒细胞白血病患者的治疗效果较差[4-5]。1，25-二羟维生素D3[1，25（OH）2D3]是维生素D在机体中主要的活性产物，不但具有调节钙磷代谢平衡的作用，还能诱导肿瘤细胞分化并抑制肿瘤细胞增殖，其目前是肿瘤研究的热点之一[6-7]。本研究选取人白血病6T-CEM细胞株作为研究对象，探讨分析了1，25（OH）2D3对人白血病6T-CEM细胞株凋亡及维生素D受体（VDR）蛋白表达的影响，为临床上寻找更好的分子靶点治疗白血病提供了理论依据。

1 材料与方法

1.1 细胞培养

人急性T淋巴细胞白血病细胞株6T-CEM由中国科学院上海生命科学研究所提供，置于-80℃冰箱中保存。培……