孙琳琳++++++王海亮++++++刘益明++++++卢会芬++++++吴国强

[摘要] 目的 建立更为科学合理的纯化水微生物限度检测法。 方法 采用薄膜过滤法，检验量分别为1 mL和10 mL，培养基分别选用营养琼脂、玫瑰红钠琼脂、平板计数琼脂、R2A培养基，对纯化水样进行微生物限度检查。 结果 采用10 mL薄膜过滤法，R2A平板培养基进行纯化水的微生物限度检查，菌体检出率高于其他方法1～2倍，菌落培养效果好。 结论 确认了最优化的检验量和检验用培养基，建立了能更准确反映纯化水质量的检测方法。该研究有利于纯化水检测方法的改进和纯化水质量控制水平的提高。

[关键词] 纯化水；微生物限度检查；薄膜过滤法；检验量

[中图分类号] R927 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）06（c）-0004-03

[Abstract] Objective To establish a more scientific and reasonable purified water microbial limit test method. Methods Membrane filtration method （sample quantity： 1 mL and 10 mL） were used to do the test， and nutrient agar， rose bengal agar medium， plate count agar and R2A medium were used to demonstrate the microbiology separately. Results Membrane filtration method （sample quantity： 10 mL） and R2A were better than the routine method and the other medium with a much higher occurrence of total aerobic plate count. The detection rate was 1-2 times higher than the rate of other method and medium. Conclusion The selected testing sample quantity and culture medium are optimal， and the optimized test method will reflect the real quality of the purified water. The study will provide support for the testing improvement and quality control level.

[Key words] Purified water； Microbial limit test； Membrane filtration method； Sample quantity

《中国药典》2010版、2015版纯化水微生物限度检查中要求使用薄膜过滤法进行检查[1-2]，但未对薄膜过滤法的检测量等进行明确规定。目前常被采用薄膜过滤法检验量1 mL。已有研究表明，薄膜过滤法1 mL和平板计数法1 mL两种方法的检测结果一致，无明显差异[3]，可见采用1 mL检验量并不能体现薄膜过滤法的优势。故薄膜过滤法1 mL的检测方法符合性、严谨性不够。

《欧洲药典》[4-5]、《美国药典》[6-7]和《英国药典》[8-9]对纯化水检测方法有不同的规定和侧重点。目前，大部分出口欧美市场的制药企业，均会按照目标出口国的国家药典要求进行纯化水检测，但对于这些检测方法的样品检验量，国内未见研究[10]。

本试验在分析2010～2012年三个年度纯化水微生物限度检测报告的基础上，拟以自制纯化水为研究对象，基于中国和欧美药典的方法，对比研究了不同方法和培养基的检测效果，明确了最佳检验量，同时明确了更灵敏的培养基，建立了更科学的纯化水检测方法。……