温之雨，董福双，张华宁，杨瑞娟,2，张艳敏

(1.河北省农林科学院 遗传生理研究所，河北省植物转基因中心，石家庄 050051；2.河北师范大学 生命科学学院，石家庄 050024)

紫花苜蓿高频体胚发生及萌发成苗技术与转基因应用

温之雨1，董福双1，张华宁1，杨瑞娟1,2，张艳敏1

(1.河北省农林科学院 遗传生理研究所，河北省植物转基因中心，石家庄 050051；2.河北师范大学 生命科学学院，石家庄 050024)

以紫花苜蓿的子叶或叶片为外植体，建立高频体胚发生及成苗技术体系，为苜蓿耐逆性状的遗传改良提供技术支撑。在愈伤诱导、体胚诱导、体胚成熟与萌发等几个关键环节，分析比较培养基组分对培养效果的影响。建立在SHDK培养基上诱导愈伤、MB(-/+)+ABA 0.4 mg/L+PEG-6000 50 g/L+蔗糖50 g/L培养基上诱导体胚、Bio2Y培养基上促体胚发育成熟、1/2 MS(或SH)培养基上体胚萌发成苗的高频再生技术体系。最适条件下，每克胚性愈伤组织可产生77.9个正常萌发成苗的健康体胚。再生植株在生长箱内经过2周20 ℃、16 h/d的光照培养后移栽温室，成活率达90%以上。利用该离体再生技术成功地将凝集素基因PPA导入苜蓿中，获得抗蚜转基因苜蓿。

紫花苜蓿；体胚发生；离体再生；转基因

苜蓿(MedicagosativaL.)是重要的豆科牧草，营养丰富，蛋白质质量分数占其干物质的17%～20%，被誉为“牧草之王”。种植苜蓿对改良土壤、保持水土及保护环境亦大有益处。中国人口众多，保障粮食生产的任务艰巨；为保证粮食生产的耕地面积，发展苜蓿必须向盐碱滩涂要空间。虽然苜蓿表现出一定的耐盐性，可在轻度盐碱土壤上生存，但尚缺乏可耐中重度盐碱的种质资源。……