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金针菇DNA提取方法比较

2017-07-13马晓凡李林

安徽农业科学 2017年2期

马晓凡 李林

摘要[目的]筛选有效的金针菇DNA提取方法。[方法]以培养的金针菇菌丝体为材料,分别采用CTAB法和试剂盒法提取金针菇DNA,并用琼脂糖凝胶电泳法和分光光度法检测所提取DNA样液的浓度与纯度。[结果]分光光度结果及电泳鉴定表明CTAB法提取的DNA产量较大但杂质多,试剂盒法提取的DNA产量小但杂质少。[结论]CTAB法和试剂盒法均可用于金针菇DNA的提取,如后续试验对提取的DNA纯度没有特别要求,可用CTAB法替代试剂盒法。

关键词 金针菇;DNA提取;CTAB法;试剂盒法

中图分类号 S646.1+5 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2017)02-0158-03

Abstract[Objective] To select the effective DNA extraction method for Flammulina velutipes.[Method] CTAB method and reagent kit method were used for extracting DNA separately by using F.velutipes mycelium as materials.The concentration and purity of DNA samples were detected by agarose gel electrophoresis method and spectrophotometric test.[Result] Compared to CTAB method,the purity of DNA extracted by reagent kit method was better,while the yield was smaller.[Conclusion] Both methods can be used for DNA extraction of F.velutipes,and if there is no strict demand for the purity of followup experiments,the reagent kit method can be replaced by CTAB method.

Key words Flammulina velutipes;DNA extraction;CTAB method;Reagent kit method

食用菌作为21世纪的朝阳产业,其市场前景广阔。随着产业的发展,有关食用菌的基础研究已深入到分子水平,从各种食用菌中提取高质量的DNA是其分子生物学研究的前提和关键[1-2]。目前以草菇、平菇、香菇等食用菌为材料的分子生物学研究较多,且DNA提取已有一些成功的报道[3-5],但作为世界上产量居第6位的食用真菌金針菇在分子生物学研究领域还有很多工作要做。DNA提取是获取高产、优良菌种的基础,提取的DNA纯度和产量对后续研究影响较大,为了更好地开展下游研究,有必要对金针菇DNA的提取方法进行筛选和优化。近年来国内外学者利用CTAB法及试剂盒法提取真菌DNA获得了较好的结果[6-8]。该研究通过对比不同提取方法所得DNA的产量、纯度,探寻有效提取金针菇DNA的方法,为其相关分子生物学研究提供资料。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源。

实验室收集到的金针菇种质资源,有蔬支(SZ)、康盛(KS)、雪榕(XR)和九道菇(JD)4个品种。……

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