高糖引起H9C2心肌细胞增殖并高表达GATA4及β-MHC
2017-07-05阮骆阳田小华潘凤娟杨彩兰徐小红
阮骆阳,田小华,潘凤娟,杨彩兰,徐小红
(广东省农垦中心医院儿科,广东湛江524002)
高糖引起H9C2心肌细胞增殖并高表达GATA4及β-MHC
阮骆阳,田小华,潘凤娟,杨彩兰,徐小红*
(广东省农垦中心医院儿科,广东湛江524002)
目的:探讨不同高糖浓度培养H9C2细胞导致心肌细胞增殖改变及可能机制。方法:体外培养H9C2大鼠心肌细胞分为6组,A-C组分别为:5mmol/L、25mmol/L、50mmol/L葡萄糖培养基,各培养48 h;D-F组分别为:5mmol/L、25mmol/L、50mmol/L葡萄糖培养基,各培养72 h。MTT法检测H9C2细胞增殖;qPCR法及Western blot法检测β-重链肌球蛋白(β-MHC)、GATA4的mRNA及蛋白表达。结果:OD值分别在培养48 h的A、B、C组及72 h的D、E、F组呈阶梯上升,C、F组达到各自时段的最高点;同一葡萄糖浓度培养基培养48 h.和72 h后发现培养时长为72 h的OD值高于48 h。A、B、C组GATA4、β-MHC的mRNA及蛋白表达逐步升高,C组达最高;D、E、F组GATA4、β-MHC的mRNA及蛋白表达逐步升高,F组达最高。结论:高糖引起H9C2心肌细胞增殖并高表达GATA4、β-MHC。
心肌细胞;锌指转录因子GATA4;β-重链肌球蛋白
代谢性疾病,如肥胖、胰岛素抵抗和2型糖尿病都与心血管疾病如心肌肥厚和心力衰竭相关,糖尿病性心肌病的特点是心肌结构和功能的改变最终导致心力衰竭。多种机制参与了糖尿病性心肌病的发病,如心肌能量代谢和钙信号的改变等。代谢障碍在糖尿病性心肌病的特点是脂质过氧化的增加,心肌内甘油三酯的积累,葡萄糖的利用降低,氧化应激增强等从而导致线粒体功能障碍与心肌细胞凋亡[1]。锌指转录因子GATA4和β-重链肌球蛋白(β-MHC)与此高度相关,我们尝试用高糖培养基培养H9C2大鼠心肌细胞,探索GATA4、β-MHC与代谢性心肌病的关系。
1 材料与方法
1.1 材料大鼠胚胎心肌细胞H9C2购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心;……
