利用微滴式数字PCR技术分析转基因玉米抗除草剂标记基因EPSP拷贝数
2017-07-01李向龙张中保邹华文吴忠义
王 犇,张 春,李向龙,张中保,邹华文,吴忠义
(1.长江大学 农学院,主要粮食作物产业化湖北省协同创新中心,湖北 荆州 434023;2.北京市农林科学院 北京农业生物技术研究中心,北京市农业基因资源和生物技术重点实验室,北京 100097)
利用微滴式数字PCR技术分析转基因玉米抗除草剂标记基因EPSP拷贝数
王 犇1,2,张 春2,李向龙2,张中保2,邹华文1,吴忠义2
(1.长江大学 农学院,主要粮食作物产业化湖北省协同创新中心,湖北 荆州 434023;2.北京市农林科学院 北京农业生物技术研究中心,北京市农业基因资源和生物技术重点实验室,北京 100097)
基于微滴式数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)平台,以转基因玉米为例,建立了转基因作物(Genetically modified crops,GM crops)外源基因拷贝数分析方法,对待测样品进行了快速鉴定,并从T0转基因玉米株系中鉴定出多个单拷贝单株。对该方法与实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法在分析结果的准确性方面进行了比较,从试验数据可以看出,2种检测方法的结果比较一致,单拷贝检测结果高度一致;但是ddPCR试验操作更加简便,试验结果可重复性强,试验数据更加准确可靠。研究表明,ddPCR方法是一种更加便捷、快速和准确的外源基因拷贝数分析新方法,基于其在准确性和灵敏度方面的显著优势,将会在转基因作物的外源基因拷贝数分析中得到广泛的应用。
微滴式数字PCR;转基因玉米;外源基因;拷贝数;绝对定量
随着转基因技术的广泛应用,转基因产品检测技术研究的一个关键点在于精准地鉴定转基因植物外源基因拷贝数[1]。……
