余铃 高天 张政佩 陶春杰 郭卫春 方志伟 樊征夫

·基础研究·

阿霉素通过激活Notch信号通路促进骨肉瘤细胞干性特性*

余铃①高天②张政佩①陶春杰①郭卫春①方志伟②樊征夫②

目的：骨肉瘤干细胞具有化疗耐药性。本文拟探讨耐阿霉素细胞干细胞样特性的改变，以及Notch通路在其中的调控作用。方法：采用2 μM的阿霉素处理骨肉瘤细胞143B 24 h，去药继续培养5 d，检测干细胞样特性的改变，包括形态学的改变、Stro-1+/CD117+双阳性细胞比例、干细胞相关基因表达、悬浮成球的能力、EMT特性。qPCR及Western blot检测Notch通路受体及靶基因表达情况。利用Notch抑制剂DAPT预处理，检测其对耐阿霉素骨肉瘤细胞的干细胞样特性的影响。构建裸鼠移植瘤模型，检测Notch抑制剂对体内成瘤的影响。结果：耐阿霉素骨肉瘤细胞中Stro-1+/CD117+比例增高，干细胞相关基因Oct4、Sox2表达量增加，悬浮成球能力增强，EMT特性上调。qPCR及Western blot结果显示阿霉素耐药的骨肉瘤细胞中Notch受体胞内段NICD1及靶基因Hes1、Hey1等表达量上调。Notch信号抑制剂能够增强骨肉瘤对阿霉素的化疗敏感性，抑制体外阿霉素对骨肉瘤干细胞的富集作用。动物实验表明，Notch抑制剂DAPT能够抑制体内成瘤。结论：阿霉素能够富集骨肉瘤干细胞，Notch信号通路参与其中调控机制，抑制Notch通路能够靶向杀伤骨肉瘤细胞，增加化疗药物敏感性。

阿霉素 骨肉瘤 Notch信号通路 肿瘤干细胞

骨肉瘤是最常见的原发恶性骨肿瘤，好发于青少年。辅助和新辅助化疗很大程度上改善了骨肉瘤患者的长期生存率，但化疗耐药和复发仍然多见［1-2］。……