刘艳红，李 静，张 骥，余孝其，李 坤

（四川大学 a.基础化学实验教学中心；b.化学学院，四川 成都 610064）

阳离子脂质体介导基因转染的实验教学改革

刘艳红a，李 静a，张 骥b，余孝其b，李 坤b

（四川大学 a.基础化学实验教学中心；b.化学学院，四川 成都 610064）

通过优化细胞转染条件，探讨脂质体与DNA的复合比例、复合时间以及转染时间对脂质体介导的基因转染效率的影响。实验采用凝胶阻滞电泳分析脂质体完全包裹DNA时二者的复合比，通过转染绿色荧光蛋白报告基因（pEGFP）研究脂质体／pEGFP的复合比例、复合时间对细胞转染效率的影响。激光扫描共聚焦成像进一步分析转染时间对细胞摄取DNA量的影响。实验结果表明，脂质体和DNA的复合比例为1.25时，细胞的转染效率最高。转染4 h后，大量DNA被细胞摄取，此时可以更换新鲜的培养基。

阳离子脂质体；基因转染；实验教学改革

“阳离子脂质体介导基因转染”是四川大学化学生物学本科实验教学中的重要实验。该实验旨在让学生了解阳离子脂质体和DNA复合物的形成过程以及细胞转染过程，训练学生的基本操作和基本实验技能，培养学生科学的思维方法和分析解决问题的能力。原有实验步骤简单、内容单调。实验时，学生只是“照方取药”，参照实验步骤进行稀释、复合、加样、记录实验结果。整个过程枯燥无味，严重影响了学生实验的兴趣，挫伤了学生实验的积极性。为此，本文结合最新的科研成果，引入现代化的分析技术，对实验进行升级改造。

采用凝胶阻滞电泳和倒置荧光显微镜观察研究脂质体和DNA的复合比例、复合时间对转染效率的影响。……