赵书梅 王霖慧 唐嘉琦 赵静宜

（中国石油大学（华东），青岛 266580）

溶藻弧菌中酯酶基因的克隆表达及其酶学性质研究

赵书梅 王霖慧 唐嘉琦 赵静宜

（中国石油大学（华东），青岛 266580）

旨在克隆溶藻弧菌中的酯酶基因，并在大肠杆菌中异源表达，研究酯酶酶学性质。从溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）7S-1的基因组DNA中克隆得到酯酶基因estZ，将该基因连接入表达载体pET28a，并在Escherichia coli BL21（DE3）中表达，对纯化后的酯酶蛋白进行酶学性质分析。结果显示，表达菌株E. coli BL21-28a-estZ可高表达具有活性的酯酶，在18℃添加0.4 mmol/L IPTG的LB培养基中诱导22 h，酯酶的比酶活可达5.42 U/μg；重组表达的酯酶EstZ最适反应温度为25℃，最适pH为9.0。10 mmol/L Na+和Mg2+对其有较好的激活作用；Cu2+、Ni2+、Co2+对该酶活性有较大抑制。该酶对多种有机溶剂及表面活性剂具有一定的耐受性，同时具有较高的耐盐性。对溶藻弧菌中的酯酶进行研究为该菌更好的应用于生物脱墨技术奠定了理论基础。

溶藻弧菌；酯酶；酶学性质

近年来，受到资源短缺和环境污染的压力，二次纤维的应用已逐渐引起重视。造纸原料中，废纸浆所占比例逐渐增加，在我国已增到38%，由于废纸品种复杂，印刷油墨配方也各不相同，脱墨成为再生纸浆的一个难题［1，2］。一般通过加碱、非离子表面活性剂、硅酸钠等处理来脱墨，由于对环境污染严重，效率也并不理想。同时，生活污水中 50%-70% 的磷来自含磷洗涤剂［3］，这些磷酸盐随废水排入江河湖海，使水质富营养化，最终在近海产生赤潮，每年给我国造成的经济损失约100 亿元人民币［4］。且传统含磷洗涤剂洗涤时间长，所需温度高，成本大，洗涤行业也因此急需环保、节能、高效的洗涤剂［5］。……