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猪Btnl5基因的克隆、表达分析及对NF-κB信号通路的调控作用

2017-06-21包琦赵凯段子渊

生物技术通报 2017年6期
关键词:检测

包琦赵凯段子渊

(1. 中国科学院西北高原生物研究所 高原生物适应与进化重点实验室 中国科学院西北高原生物研究所 高原鱼类进化与功能基因组学实验室,西宁 810001;2. 中国科学院遗传与发育生物学研究所 遗传资源中心,北京 100101;3. 中国科学院大学,北京 100049)

猪Btnl5基因的克隆、表达分析及对NF-κB信号通路的调控作用

包琦1,2,3赵凯1段子渊2

(1. 中国科学院西北高原生物研究所 高原生物适应与进化重点实验室 中国科学院西北高原生物研究所 高原鱼类进化与功能基因组学实验室,西宁 810001;2. 中国科学院遗传与发育生物学研究所 遗传资源中心,北京 100101;3. 中国科学院大学,北京 100049)

猪类嗜乳脂蛋白5(Btnl5)属于嗜乳脂蛋白家族,其同源蛋白多为免疫调节蛋白,为探索Btnl5的序列特征及其功能,利用反转录PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术对Btnl5基因cDNA全长进行克隆及序列分析,采用定量PCR技术检测Btnl5在猪不同组织中的表达丰度,利用报告基因法检测Btnl5对NF-κB信号通路的影响。克隆得到Btnl5基因cDNA全长共3 334 bp,包含1 680 bp的开放读码框,可编码长度为559个氨基酸残基的多肽链。蛋白结构预测表明Btnl5编码的蛋白含有信号肽、两段免疫球蛋白结构域、跨膜结构域和B30.2结构域。定量PCR分析表明,在检测的11个组织中,Btnl5只在空肠中具有较高水平的表达。报告基因检测结果显示Btnl5对NF-κB信号通路有一定的抑制作用。研究结果说明,Btnl5可能通过抑制NF-κB信号通路参与调节肠道免疫。

猪;类嗜乳脂蛋白5;表达分析;报告基因检测;核因子κB

嗜乳脂蛋白家族包……

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