赵学梅，徐天娇，董妙先＊＊

（1.齐齐哈尔医学院药学院齐齐哈尔161006；2.齐齐哈尔医学院医药科学研究所齐齐哈尔161006）

镇肝熄风汤含药血清激活Nrf2/ARE信号通路对6-OHDA诱导PC12细胞氧化应激的保护作用＊

赵学梅1，徐天娇2，董妙先2＊＊

（1.齐齐哈尔医学院药学院齐齐哈尔161006；2.齐齐哈尔医学院医药科学研究所齐齐哈尔161006）

目的：研究镇肝熄风汤含药血清对6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine，6-OHDA）致PC12细胞氧化应激的保护作用及其相关机制。方法：应用镇肝熄风汤低剂量（8 g·kg-1）、中剂量（16 g·kg-1）和高剂量组（32 g·kg-1）大鼠的含药血清或空白血清预处理PC12细胞1 h后，加100 μM 6-OHDA共孵育24 h后收集细胞。二氯荧光素双醋酸盐（DCFH-DA）荧光探针染色法结合荧光酶标仪检测活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS）水平，采用实时定量PCR检测核转录因子E2相关因子2（Nuclear Factor-erythroid 2 Related Factor 2，Nfe2l2））基因Nfe2l2、血红素加氧酶-1（Heme Oxygenase-1，HO-1）、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基（Glutamate-Cysteine Ligase Catalyticsubunit，GCLc）和调节亚基（GCLm）mRNA表达。采用荧光素酶报告基因系统检测抗氧化反应元件（Antioxidant Response Element，ARE）活性。结果：镇肝熄风汤含药血清抑制了6-OHDA诱导的氧化应激，上调了6-OHDA处理细胞中Nfe2l2、HO-1和GCLc mRNA表达，但是对GCLm mRNA表达没有显著影响。结论：镇肝熄风汤含药血清对6-OHDA诱导PC12细胞氧化应激具有保护作用，其机制可能与上调Nfe2l2 mRNA表达，使ARE激活进一步诱导其下游II相解毒酶基因和抗氧化酶基因HO-1和GCLc mRNA表达有关。

镇肝熄风汤6-羟基多巴胺活性氧簇Nfe2l2抗氧化反应元件含药血清

帕金森病（Parkinson's Disease，PD）是以中脑黑质多巴胺（Dopamine，DA）能神经元变性死亡为主要病理改变的运动障碍性疾病[1]。目前黑质多巴胺能神经元变性确切的发病机制还不完全清楚。近期研究表明，PD的多种致病因素均可通过氧化应激这一共同通路造成神经元的损伤，氧化应激反应是PD的发病的重要机制[2，3]。……