张玉 邵建国 陈琳 卞兆连 刁花玉 达坤林



季德胜蛇药通过调控miR-335抑制肝癌Huh-7细胞增殖作用机制探讨

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目的 探讨季德胜蛇药对肝癌Huh-7细胞增殖作用的影响并进一步从miRNA层面探讨其抑制增殖的调控机制。方法 以肝癌Huh-7细胞为模型，制备不同浓度的兔含药血清后培养Huh-7细胞，并同时设置相应浓度的对照组。CCK-8实验检测转染miR-335入Huh-7细胞后对该细胞增殖能力的影响；采用实时定量聚合酶链式反应qRT-PCR检测季德胜蛇药含药血清对Huh-7细胞中miR-335的调控作用；CCK-8实验检测季德胜蛇药含药血清对Huh-7细胞增殖能力的影响；Western-blot检测miR-335潜在靶向Bcl-w表达水平的变化。结果 miR-335过表达后CCK-8实验组与空白对照组及阴性对照组相比，其OD值显著降低(P<0.01)。含药血清干预下，与对照组相比，同等浓度的蛇药组miR-335表达水平较高，且在一定浓度范围内含药血清浓度越高，miR-335在Huh-7细胞中的表达也相继增高；此外，CCK-8实验下季德胜蛇药含药血清组都较正常血清组OD值低，且浓度越高，其OD值越低，都有较明显的统计学差异(P<0.01)。上调miR-335后，Huh-7细胞Bcl-w蛋白表达水平降低。结论 季德胜蛇药通过调控miR-335能抑制肝癌Huh-7细胞增殖。

季德胜蛇药； 人肝癌细胞； miR-335； Bcl-w

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是常见的恶性肿瘤之一，其发病率在全球居第五位。目前HCC患者的5年生存率不到10%，死亡率位于各大恶性肿瘤第二位[1-2]。HCC确诊时已多属中、晚期，又由于肿瘤细胞的侵袭转移、凋亡逃避、血管生成以及肿瘤耐药等复杂的生物学行为也为HCC的根治带来一定的困难，预后极差[3-4]。因此，深入研究肿瘤在这些复杂生物学恶性表型形成中的信号传递及调节机制具有重要的理论和临床应用价值。季德胜蛇药片是中国特色中成药之一，能够清热解毒，活血化瘀止痛。目前主要用于治疗蛇虫咬伤，但近年来在临床实践中运用该药治疗肝癌也起到一定疗效。因此本研究旨在观察季德胜蛇……