胡玲玲 ， 汤德元 ， 曾智勇 ， 黄 涛 ， 李 达 ， 韦冠东 ， 龙冬梅

(贵州大学动物科学学院 ， 贵州贵阳550025)

贵州某动物园羊驼坏死梭杆菌感染的诊治

胡玲玲 ， 汤德元 ， 曾智勇 ， 黄 涛 ， 李 达 ， 韦冠东 ， 龙冬梅

(贵州大学动物科学学院 ， 贵州贵阳550025)

2016 年1月29日，贵州某动物园有羊驼4只，4～5岁，其中3只羊驼出现跛行，检查发现：发病羊驼跖关节部体表皮肤发生化脓、坏死，伴有明显臭味。根据临床症状和实验室诊断，确诊为坏死梭杆菌感染所引起的羊驼皮肤溃疡。诊治结果报告如下。

1 临床症状

发病羊驼表现精神不振，病初厌食，体温38 ℃，呼吸次数11次/min，心率90次/min，流涎，有口臭，口腔红肿、发热，喜卧，不愿走动，触诊羊驼跖关节发病部位疼痛明显，病变皮肤出现严重结痂(见中插彩版图1)，并不断蔓延(见中插彩版图2)，部分还呈现肿胀、化脓、坏死，流出黑黄色坏死脓液并伴有明显臭味，有的形成瘘管等。溃烂多局限于皮下脂肪和结缔组织，患肢肿胀、变形，呈现高度跛行。

2 实验室诊断

2.1 细菌染色镜检 无菌条件取坏死组织与健康组织交界处的组织，并刮取皮肤溃疡内部脓液，分别涂片，革兰染色，镜检，油镜下观察可见有革兰阴性、多种形态的细菌(图3)，无荚膜。

2.2 细菌分离培养 在无菌条件下用接种环挑取病料分别接种血液琼脂平板和普通营养琼脂平板，于 37 ℃ 厌氧/需氧恒温箱中培养 24～48 h。观察结果发现，厌氧的血液琼脂培养基上形成3种菌落：一种菌落平坦光滑，边缘不整齐，灰白，呈β溶血；另一种菌落扁平，边缘不整齐，呈黄色，表面粗糙，也呈β溶血。一种菌落中间突起呈黄色，周围灰色平坦不规则，边缘不整齐，呈自溶血；并且发出恶臭味。取可疑菌落再进行纯培养，得到细菌的纯培养物，然后进行进一步的鉴定，将细菌的纯培养物涂片、染色镜检，结果观察到与涂片染色镜检类似的细菌。疑为坏死梭杆菌感染。

图3 革兰阴性、多形态细菌(10×100)

2.3 生化鉴定 将分离纯化的细菌在无菌的条件下分别进行葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖等发酵试验，硫化氢试验，靛基质试验，明胶试验，硝酸盐试验，赖氨酸脱羧酶试验和吲哚试验。结果表明，该菌能发酵葡萄糖、麦芽糖、果糖和蔗糖，产气产酸，分解明胶，硫化氢、靛基质阳性，赖氨酸脱羧酶阳性，吲哚试验阳性，不还原硝酸盐。疑为坏死梭杆菌感染。

2.4 动物试验 取血琼脂上培养的菌落制成悬液0.5 mL注射，生长条件相同的 5 只小鼠臀部皮下，对照组5只注射等量生理盐水，结果试验组小鼠 2 d内均死亡，对照组小鼠正常存活。剖检发现，小鼠肺脏、心脏与胸膜粘连，部分见颌下水肿，咽部有严重溃疡，个别在肺部有大小不等的圆硬样灰黄色结节，切面干燥，肺门淋巴结肿大，有大量脓性分泌物附着。取病变脏器，组织触片，染色镜检发现类似大量多形态的革兰阴性菌。

3 确诊

根据临床症状、流行特点和细菌分离培养、生化鉴定及动物试验诊断结果，确诊为坏死梭杆菌感染。

4 治疗

对羊驼坏死梭杆菌感染采用局部治疗和全身治疗相结合。在局部治疗中，首先对患部皮肤清创，对患部剪毛，清洗消毒，清除坏死组织、脓汁和异物，患部扩创后用 0.1% 高锰酸钾溶液清洗，然后涂上碘酊，用生理盐水冲洗后，在坏死灶内撒入青霉素粉末，再涂抹鱼石脂软膏，用纱布包扎，每天清洗换药1次，连换3 d。用青霉素80万 IU×5支，15 mL生理盐水稀释后肌肉注射，1天2次，连续注射3 d；同时用中药硝黄散加减内服：黄连20 g、黄芩18 g、黄柏18 g、栀子20 g、浙贝母20 g、天花粉18 g、甘草10 g、连翘20 g、黄药子18 g、白药子18 g，打粉水煎20 min内服，每天每头羊驼1剂，连服3剂。同时向羊驼群投喂维生素片，剂量3 g/只，2次/d，连用5 d以提高其治疗效果。

5 讨论

坏死梭杆菌病是由坏死梭杆菌引起的侵害家畜、家禽和野生动物的一种慢性传染病，一般呈散发或地方性流行，以蹄部、皮下组织或消化道黏膜坏死为特征，有时会转移到发病动物的内脏器官(如肝和肺)形成坏死灶。关于羊驼坏死梭杆菌病病例报道少见。羊驼坏死梭杆菌病在缺乏治疗情况下，常造成羊驼严重消瘦、脱毛、影响其观赏性能及生产性能甚至死亡。临床上坏死灶常局限于肢蹄部，严重病例可感染唇部、面部、消化道、生殖道以及肝、肺等内脏器官，引起肝脏、肺脏的坏死。特别是怀孕母畜的阴道和子宫感染坏死梭杆菌时，可导致流产和仔畜严重发病。羊驼属于国家二级保护动物，在动物园主要作观赏用，但感染坏死梭杆菌后会影响观赏价值。

该动物园羊驼所患坏死梭杆菌病经过以上治疗1周后可见患处已结痂未见浓汁渗出，并未外扩，且跛行现象减弱，精神及食欲状态在逐渐恢复；2周后结痂开始慢慢脱落、可以明显看到新肉长出，并能正常缓慢行走；3周后患处结痂完全脱落，依稀有毛发生长，新生皮肤红嫩，羊驼行走、食欲及精神状态基本恢复正常。该病治疗期稍长，常常因为圈舍潮湿、淤泥不洁、碎石铺盖的泥土损伤蹄部而引发，动物蹄部长期浸渍或损伤，使得病菌通过皮肤伤口进入机体，或为蹄底损伤或蹄叉中、侧沟扎伤所引起。羊驼坏死梭杆菌感染症状分为前期、中期和后期。该病前期患病动物表现为精神不佳，被毛紊乱无光泽，喜卧，不愿运动；中期动物皮肤温度升高，并表现出急性皮炎症状，运步缓慢；后期表现为体温升高，精神不振，蹄冠部发生热痛性肿胀，皮肤坏死侵害到关节，破溃后有粘稠的浓汁排出，并带有恶臭的分解物。若不及时治疗，可转移至皮肤及内脏器官，引起坏死性病变，导致死亡。该病宜采取合理饲养管理，科学预防。对圈舍及其周围环境彻底清扫，再用强毒杀等消毒液对地面、用具进行全面消毒，并保持舍内卫生、干燥，避免羊驼蹄部与皮肤被石块、铁钉、玻璃等尖锐物品刺伤。

2016-05-18

贵州省科学技术基金项目资助(黔科合J字[2013]2110号)

胡玲玲(1993-)，女，硕士生，研究方向为动物传染病病原分子生物学，E-mail:18285118682@163.com

汤德元，E-mail:tdyuan@163.com

S852.61+6.3

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0529-6005(2017)05-0049-01