谭晓丽吕晓东王真

·论著·

洋金花总碱对人肺腺癌A549细胞EMT过程中E-cad表达的影响

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目的观察洋金花总碱对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的A549细胞向间质细胞转化（EMT）过程中E-钙黏蛋白（E-cad）表达的影响。方法将体外培养的A549细胞随机分为空白对照组，TGF-β1组及洋金花总碱低、中、高浓度药物组，分别作用24、48、72h后，通过Western-blot及RT-PCT检测各组A549细胞E-cad表达的变化。结果24、48、72hE-cad表达，空白对照组分别为（1.49±0.12）、（2.52±0.07）、（2.58±0.21）；TGF-β1组分别为（0.66±0.01）、（0.50±0.13）、（0.52± 0.08）；洋金花总碱低、中、高浓度药物组分别为24h[（0.67±0.12）、（0.67±0.12）、（1.12±0.05）]、48h [（0.70±0.28）、（1.02±0.08）、（1.10±0.13）]、72h[（0.68±0.04）、（1.25±0.11）、（1.30±0.09）]。与空白对照组比较，TGF-β1组和洋金花总碱低、中、高浓度药物组的E-cad表达均明显减少（P<0.01）；与TGF-β1组比较，各时间段的洋金花总碱低浓度组E-cad表达无明显变化（P>0.05），但48、72h洋金花总碱中、高浓度组E-cad表达明显增加（P<0.01）；与24h低浓度药物组比较，24h中浓度药物组E-cad表达差异无统计学意义（P>0.05），但作用48、72h后，中浓度药物组的E-cad表达明显增加（P< 0.01），而高浓度药物组3个时间点的E-cad表达均明显增加（P<0.01）。与中浓度药物组比较，24h高浓度药物组E-cad表达增加（P<0.05），48、72h高浓度药物组E-cad表达差异无统计学意义（P> 0.05）。与空白对照组比较，不同浓度作用的洋金花总碱药物组使E-cad mRNA表达上调（P<0.01），并且在72h及高浓度时最明显（P<0.01）。结论洋金花总碱通过增加上皮标志物E-cad表达，可抑制A549细胞的上皮间质转化。

肺腺癌细胞；A549细胞；洋金花总碱；上皮细胞间质化；E-cad

特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）是一种慢性、不可逆性的致命性肺疾病，而肺泡上皮细胞向间质细胞转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）被认为是肺纤维化的重要病理生理机制之一[1]，研究EMT及其相关信息传导通路可为抑制肺纤维化进程提供有效策略。有研究表明，在众多参与EMT的细胞因子中，转化生长因子-β1（transforming growthactor-β1，TGF-β1）起着关键作用[2]。E-钙黏蛋白（E-Cadherin，E-cad）是上皮细胞跨膜蛋白，特异性较高，常用于标志性表示上皮细胞。x药理研究发现洋金花的主要有效成分为东莨菪碱[3]，表现为抑制毒蕈碱样作用。实验证实，M受体阻滞剂噻托溴胺能浓度依赖性抑制乙酰胆碱、TGF-β1诱导的成纤维细胞的增殖[4]。本研究观察洋金花总碱对TGF-β1诱导的A549细胞EMT过程中E-cad表达的变化，为洋金花总碱抗纤维化作用提供实验依据。……