王相子 徐小艳 徐正军 开 妍 周 伟 陈昌海

（江苏省动物疫病预防控制中心，江苏南京 210036）

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-7株）免疫抗体监测分析

王相子 徐小艳 徐正军 开 妍 周 伟 陈昌海

（江苏省动物疫病预防控制中心，江苏南京 210036）

为评估我省使用重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-7株）后的鸡群免疫效果，更好的开展禽流感防控工作，笔者对2014-2015年全省春、秋防及日常监测所采集的规模养鸡场及散养户样品进行了免疫抗体检测与分析。检测结果表明，江苏省H5亚型高致病性禽流感Re-6株平均免疫抗体合格率为96.84%；Re-7株平均免疫抗体合格率为95.95%。大部分地区的免疫抗体效价呈现较高的一致性。种鸡场的H5亚型禽流感免疫效果整体最好。2015年H5亚型高致病性禽流感Re-6株和Re-7株的免疫效果均高于2014年。

高致病性禽流感；血凝抑制试验；免疫抗体合格率

禽流感（avian influenza，AI）在世界各地发生，具有重要公共卫生意义。高致病性禽流感被世界动物卫生组织列为必须报告的动物传染病，我国将其列为一类动物疫病，其暴发和流行可对家禽业造成巨大的经济损失。目前，强制免疫是我国作为防控高致病性禽流感的主要措施之一。

2014年9月开始，我省根据农业部兽医局要求，将当时对鸡群使用的重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-4株）替换为重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-7株）。为评估我省使用该疫苗后的鸡群免疫效果，更好的开展禽流感防控工作，笔者对2014-2015年全省春、秋防及日常监测所采集的规模养鸡场及散养户样品进行了免疫抗体检测与分析。

1 材料与方法

1.1 材料

样品来源：2014年11月～2015年11月江苏省动物疫病预防控制中心在开展重大动物疫病春防、秋防、日常监测等工作中，随机抽检的鸡血清样品2372份，所检鸡群均免疫了重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-7株），免疫密度达100%。样品来自全省13个市38个县82个乡镇的451个场（户）。

检测试剂：禽流感病毒H5亚型（Re-6株）血凝抑制试验抗原、阳性血清、阴性血清；禽流感病毒H5亚型（Re-7株）血凝抑制试验抗原、阳性血清、阴性血清，均由哈尔滨维科生物技术开发公司提供，自配1%鸡红细胞。

1.2 方法

参照《高致病性禽流感诊断技术》GB/T 18936-2003中规定的血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验技术，通过血凝试验结果配制4HAU的病毒抗原，采用血凝抑制试验检测血清中H5亚型高致病性禽流感免疫抗体。

1.3 结果判定

以完全抑制4个HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI滴度，即血清效价。根据农业部标准，鸡免疫21d后，抗体效价≥24判为免疫合格；抽检鸡群免疫抗体合格率≥70%判为合格。

2 检测结果

共检测鸡血清样品4742份，合格4571份，合格率96.39%。其中H5亚型Re-6株共检测样品2370份，合格2295份，合格率96.84%，H5亚型Re-7株共检测样品2372份，合格2276份，合格率95.95%。

2.1 各地区的疫苗免疫抗体合格率

在对全省13个市的免疫抗体检测合格率进行比较后发现，全省13个市的高致病性禽流感免疫抗体合格率均高于农业部规定的70%和我省规定的80%的标准。H5亚型高致病性禽流感（Re-6株）全省平均免疫抗体合格率为96.84%；H5亚型高致病性禽流感（Re-7株）全省平均免疫抗体合格率为95.95%。详见表1。

表1 各市免疫抗体检测结果

2.2 不同类别鸡群的免疫抗体合格率

共检测各类养殖场户共451个，其中种鸡场11个，Re-6株共检测样品154份，合格153份，合格率99.35%；Re-7株共检测样品156份，合格153份，合格率98.08%；规模场46个，Re-6株共检测样品684份，合格673份，合格率98.39%；Re-7株共检测样品681份，合格661份，合格率97.06%；散养户394个，Re-6株共检测样品1532份，合格1469份，合格率95.89%；Re-7株共检测样品1535份，合格1462份，合格率95.24%。详见表2。

表2 不同类别鸡群的免疫抗体检测结果

表3 不同年份免疫抗体检测结果

2.3 不同年份的免疫抗体合格率

2014年，全省H5亚型高致病性禽流感Re-6株共检测样品717份，合格690份，合格率为96.23%，Re-7株共检测样品723份，合格692份，合格率95.71%；2015年，全省Re-6株共检测样品1653份，合格1605份，合格率97.10%，Re-7株共检测样品1649份，合格1584份，合格率96.06%。详见表3。

3 讨论

从检测结果来看，2014～2015年江苏省存栏鸡群的H5亚型高致病性禽流感Re-6株和Re-7株的免疫抗体合格率均达到农业部标准及我省省级标准，且免疫抗体整体水平较高，抗体水平持续平稳，说明重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-7株）在我省应用效果良好。

进一步对比这两年我省13个市存栏鸡群重组禽流感病毒灭活疫苗免疫效果发现，13个市的免疫抗体检测结果之间也存在着差别。2014～2015年，13个市的H5亚型Re-6株疫苗平均免疫抗体合格率为96.84%，其中最高的市为100%，最低为87.11%；H5亚型Re-7株疫苗平均免疫抗体合格率为95.95%，其中最高的市为100%，最低为86.60%。从图一看，首先，Re-6株与Re-7株疫苗免疫抗体合格率相比较发现，大部分地区呈现出了较高的一致性，个别地区出现两者差异较大（免疫抗体合格率分别为97.46% 和90.68%）的情况；其次，大部分地区的免疫抗体合格率均分布在全省平均免疫抗体合格率附近，但有个别地区出现与平均免疫抗体合格率差距较大的情况。说明我省大部分地区的高致病性禽流感疫苗免疫工作正在有效地、合理地开展。

图1 13个市重组禽流感疫苗免疫效果分布

2014～2015年，共监测来自451个养鸡场（户）的4742份样品，其中监测种鸡场11个，Re-6株平均免疫抗体合格率为99.35%，Re-7株平均免疫抗体合格率为98.08%，且每个种鸡场的免疫抗体合格率均高于80%；监测商品代养鸡场46个，Re-6株平均免疫抗体合格率为98.39%，Re-7株平均免疫抗体合格率为97.06%，有44个场的免疫抗体合格率高于80%，占商品代养鸡场总数的95.65%；监测散养户394个，Re-6株平均免疫抗体合格率为95.89%，Re-7株平均免疫抗体合格率为95.24%，有367户的免疫抗体合格率高于80%，占散养户总数的93.15%。从图二看，首先，各类别鸡群Re-6株和Re-7株免疫抗体合格率较一致；其次，三种不同类别鸡群中，种鸡场的H5亚型禽流感疫苗整体免疫效果较商品代养鸡场、散养户好。分析原因，种鸡场和商品代养鸡场多按程序免疫；而散养户的多通过春、秋季开展的疫苗集中免疫行动进行免疫，免疫条件相对较差，因而导致有些地方出现免疫效果相对偏低的情况，因而建议有条件的地方尽量采取程序免疫的方式。

图2 不同类别鸡群免疫抗体合格率对比情况

2014年，H5亚型Re-6株免疫抗体合格率为96.23%，Re-7株免疫抗体合格率为95.71%；2015年，H5亚型Re-6株免疫抗体合格率为97.10%，Re-7株免疫抗体合格率为96.06%。比较发现，通过重组疫苗的持续使用，Re-6株和Re-7株免疫抗体合格率均有所提高，Re-6株提高了0.87%，Re-7株提高了0.35%。说明通过持续开展该疫苗的免疫，全省疫苗免疫抗体水平处于持续向好的状态。

[1] 甘孟侯.禽流感（第二版）[M].北京：中国农业出版社，2002：181.

[2] 徐小艳.重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗免疫抗体监测与分析[J].畜牧与兽医，2011，43（6）：50-52.