李旭娟，字秋艳，李纯佳，刘洪博，林秀琴，徐超华，陆鑫，毛钧，刘新龙

（云南省农业科学院甘蔗研究所/云南省甘蔗遗传改良重点实验室，云南开远 661699）

甘蔗TAD1(ScTAD1)的克隆与表达分析

李旭娟，字秋艳，李纯佳，刘洪博，林秀琴，徐超华，陆鑫，毛钧，刘新龙

（云南省农业科学院甘蔗研究所/云南省甘蔗遗传改良重点实验室，云南开远 661699）

【目的】Tillering and Dwarf 1（TAD1）是植物株型发育的重要调控基因，该基因与腋芽的形成发育密切相关。获得甘蔗TAD1（ScTAD1）并预测其结构和功能，分析其在甘蔗不同组织部位、不同发育阶段腋芽中及在用生长素（IAA）和细胞分裂素（6-BA）处理后的蔗苗非伸长茎梢部的表达情况，以期为ScTAD1的功能分析及其在甘蔗产量分子辅助育种中的利用奠定理论基础。【方法】采用电子克隆技术并结合反转录 PCR（reverse transcription PCR，RT-PCR），cDNA末端快速扩增（rapid-amplification of cDNA ends，RACE）等技术获得ScTAD1的cDNA全长，然后利用生物信息学方法对其序列结构、功能、同源性进行分析；再使用实时荧光定量PCR（real-time fluorescent quantitative PCR，qPCR）技术对该基因在甘蔗品种ROC22不同组织部位（根、茎、叶、分蘖芽、叶鞘、生长点）、茎尖生长点和不同发育阶段腋芽（幼嫩腋芽、半大腋芽、较大腋芽、成熟休眠腋芽）及叶片分别喷施IAA和6-BA不同时间点幼苗非伸长茎梢部的表达特征进行分析。【结果】获得ScTAD1的cDNA全长（GenBank登录号为KX611166），序列分析发现其包含1个1 560 bp的完整开放阅读框，编码519个氨基酸残基，其编码蛋白分子量为55.57 kD，理论等电点pI为9.16。保守结构域分析表明ScTAD1包含7个WD40重复序列的保守结构域；信号肽预测结果表明 ScTAD1蛋白不存在信号肽，为非分泌蛋白；三……