刘鹭，芦晶，王莹，逄晓阳，许嫚，张书文，吕加平

（中国农业科学院农产品加工研究所/农业部农产品加工与质量控制重点开放实验室，北京 100193）

基于差异蛋白质组学解析紫色杆菌素抑制结肠癌细胞HT29的作用机制

刘鹭，芦晶，王莹，逄晓阳，许嫚，张书文，吕加平

（中国农业科学院农产品加工研究所/农业部农产品加工与质量控制重点开放实验室，北京 100193）

【目的】对紫色杆菌素作用后的结肠癌细胞HT29进行差异蛋白质组学分析，探究其影响的代谢通路，揭示其抑制癌细胞生长的作用机制，为新型抗癌药物的开发提供一定的参考。【方法】以不同剂量的紫色杆菌素处理HT29 24、48、72 h，通过MTT试验以及透射电镜分析其对结肠癌细胞的有效抑制剂量及抑制情况。在此基础上，对提取的3个处理组的蛋白进行同位素标记，利用反相液相色谱（RP-LC）联用串联质谱（AB SCIEX Triple TOF 5600）获得样品中的多肽及其相对丰度信息，通过数据库（NCBI. Human. protein database）搜索比对，鉴定差异表达蛋白。利用GO分析、KEGG信号通路分析，解析紫色杆菌素抑癌作用代谢途径。【结果】紫色杆菌素对HT29的抑制作用呈一定的时间、剂量依赖性。当紫色杆菌素对HT29的抑制率达50%时，仅为阳性药物5-Fu剂量的1/6，具有更明显的抑制效果。电镜下观察显示，随着紫色杆菌素剂量增大，细胞内部线粒体出现空泡结构，质膜出泡；当浓度达30 mg·L-1时，细胞膜消失，染色质边集。通过差异蛋白质组学分析，共鉴定出4 258个蛋白，表达差异在2倍以上的蛋白共为757个。其中高剂量组处理差异蛋白数为492个，低剂量组处理的差异蛋白数为112个，阳性对照组差异蛋白数为336个。……